[发明专利]一种鹅星状病毒弱毒的制备方法及应用

说明书

本发明提供了一种鹅星状病毒弱毒的制备方法以及应用鹅星状病毒弱毒制备的活疫苗，属于水禽疾病预防与防控技术领域，本方法采用高温处理和低温孵育相结合的方法致弱病毒，该方法致弱病毒时间短，成本低，免疫保护时间长，且经多次传代后，没有毒力返强，可有效的预防鹅星状病毒引起的鹅痛风病。

技术领域

本发明属于病毒制备领域，具体涉及一种鹅星状病毒弱毒的制备方法及应用。

背景技术

鹅痛风病是由鹅蛋白质代谢异常引发的一种疾病，主要特征是在体内产生并沉积大量的尿酸盐，心脏、肝、肾、血液、关节都有大量尿酸盐沉积，导致雏鹅站力不稳，少食，体重下降甚至死亡，2017年初，在我国山东、安徽、广东、广西等地出现了大量鹅痛风病的爆发，给养殖户造成了巨大的经济损失，研究者在痛风发病的雏鹅身上分离到了新型的鹅星状病毒，发现鹅星状病毒感染是诱发鹅痛风病的主要因素。

目前能够预防鹅痛风病的方法主要以疫苗为主，其中大部分鹅痛风疫苗都为灭活疫苗，但灭活疫苗并不能诱导较强的免疫反应，而且保护时间短，往往需要多次免疫。弱毒活疫苗虽然能够诱发较强的免疫反应，作用时间长，但是存在安全隐患，而且成本较高，此外，减毒后的疫苗免疫后也存在毒力返强的风险。

发明内容

针对上述现有技术，本发明的目的是提供一种鹅星状病毒弱毒的制备方法。

本发明的目的是提供一种引起鹅痛风病的弱毒。

本发明的目的是提供一种鹅痛风病疫苗。

为达到上述目的，本发明的技术方案为：

一种鹅星状病毒弱毒的制备方法，包括：

1)将分离得到的鹅星状病毒液在45℃-50℃水浴中处理55-65min，然后经鹅胚接毒并孵化，孵化温度控制在35℃-38℃，6-7天后收取鹅胚尿囊液；

2)取步骤1)中收取鹅胚尿囊液在50℃-56℃水浴中处理55-65min，然后经鹅胚接毒并孵化，孵化温度控制在33℃-34℃，6-7天后收取鹅胚尿囊液；

3)按步骤2)的方法连续传代3次；

4)收取步骤3)中传代后的鹅胚尿囊液在50℃-56℃水浴中处理55-65min，然后经鹅胚接毒并孵化，孵化温度控制在31℃-32℃，6-7天后收取鹅胚尿囊液；

5)按步骤4)的方法连续传代3次；

6)将步骤5)中传代后的鹅胚尿囊液在50℃-56℃水浴中处理55-65min，然后经鹅胚接毒并孵化，孵化温度控制在29-30℃，6-7天后收取鹅胚尿囊液；

7)按步骤6)的方法连续传至第15代，收取鹅胚尿囊液作为鹅星状病毒弱毒；

进一步的，使用该方法制备的引起鹅痛风病的弱毒。

进一步的，鹅痛风病弱毒制备的鹅痛风病疫苗。

进一步的，制备的疫苗为活疫苗。

进一步的，鹅痛风病弱毒与灭菌吐温-80的比例为20～25:1。

进一步的，鹅痛风病弱毒的氨基酸序列中纤突蛋白的130位点密码子为GAA。

相对于现有技术，本发明具有以下优势：

1.本发明提供的鹅星状病毒弱毒的制备方法能够有效致弱鹅星状病毒的毒力，且毒力稳定，多次传代后未出现毒力返强的现象。

2.本发明提供的鹅星状病毒弱毒的制备方法，致弱病毒时间短，成本低。

3.本发明提供的鹅痛风病毒活疫苗免疫保护时间长，保护率可达100％。

附图说明