[发明专利]一种通用型的口蹄疫病毒结构蛋白抗体及其阻断ELISA检测试剂盒

说明书

本发明提供了通用型的口蹄疫病毒结构蛋白抗体及其阻断ELISA检测试剂盒，属于病毒检测技术领域。通用型口蹄疫病毒结构蛋白阻断ELISA抗体检测试剂盒，包括以下组成：包被抗原的酶标板、浓缩生物素标记单抗；浓缩生物素标记单抗中的单抗为单克隆抗体E32；包被抗原的酶标板为通过单克隆抗体F104间接包被FMDV抗原。E32和F104抗体特异性结合在FMDV结构蛋白VP2蛋白中的型间保守抗原表位，灵敏度和特异性均高，适用于O、A与Asia1型FMDV感染或灭活疫苗免疫后结构蛋白抗体的检测，是一种FMD非免疫动物群体感染状况监测的新方法，为FMDV结构蛋白VP2表位缺失的标记疫苗提供配套鉴别诊断方法。

技术领域

本发明属于病毒检测技术领域，具体涉及一种通用型的口蹄疫病毒结构蛋白抗体及其阻断ELISA检测试剂盒。

背景技术

口蹄疫(foot-and-mouth disease，FMD)是由口蹄疫病毒(foot-and-mouthdisease virus,FMDV)感染引起的偶蹄动物共患的一种烈性传染病。其发病率极高，对养殖业和国际畜产品贸易具有严重影响，因而各国高度重视对此病的预防与控制。预防与控制口蹄疫的关键是高效疫苗和准确诊断方法的应用。目前，我国口蹄疫的防治主要依靠灭活疫苗免疫，在此背景下，检测FMDV非结构蛋白(NSP)抗体是目前鉴别感染动物与免疫动物的有效方法，也是不区分血清型的FMDV感染状况监测评估方法，而基于结构蛋白的通用FMDV抗体检测方法，仍然未见报道。基于结构蛋白的通用检测方法的研究，对于非免疫背景下，FMDV感染状况的调查具有重要的应用价值，由于针对结构蛋白的抗体应答往往较非结构蛋白快而且应答水平高，因此，检测结构蛋白抗体可以更早的发现感染状况，对FMDV的防控具有重要的意义。同时，基于结构蛋白表位缺失的标记疫苗研究也仍然是空白，基于结构蛋白的表位缺失标识疫苗的研究，将可能促进廉价高效FMDV灭活疫苗的诞生，研究基于结构蛋白的表位缺失负标记疫苗及检测缺失表位抗体的ELISA方法，将为口蹄疫防控提供低成本与高效的防控技术与产品。

FMDV有七个血清型，分别为O、A、C、SAT1、SAT2、SAT3和AsiaI型，各型之间无交叉保护，但是存在血清学上的交叉反应。目前，我国主要流行O型和A型FMDV。FMDV抗原结构复杂，不同血清型、基因型和分离株的抗原位点和抗原表位都不尽相同，存在广泛的抗原变异，同时也存在着决定病毒种属特性的保守抗原结构，开发广谱型的口蹄疫病毒抗体检测试剂盒，需要筛选到识别型间保守表位的广谱特异性单克隆抗体，但目前广谱特异性单克隆抗体稀少，这给建立广谱的FMDV抗体检测方法带来一定障碍。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的在于提供一种通用型的口蹄疫病毒结构蛋白抗体，所述口蹄疫病毒结构蛋白抗体能识别型间保守表位的广谱特异性单克隆抗体，具有较高的特异性。

本发明的目的还在于基于上述通用型的口蹄疫病毒结构蛋白抗体制备的通用型口蹄疫病毒结构蛋白阻断ELISA抗体检测试剂盒，用于非免疫背景下动物FMDV感染状况的监测，具有特异性好，敏感性高的特点。

本发明提供了一种通用型的口蹄疫病毒结构蛋白的单克隆抗体E32，包括重链可变区HV1和轻链可变区LV1，所述重链可变区HV1的氨基酸序列如SEQ ID No.3所示；所述轻链可变区LV1的氨基酸序列如SEQ ID No.4所示。

本发明提供了一种通用型的口蹄疫病毒结构蛋白的单克隆抗体组合物，包括所述的单克隆抗体E32和通用型的口蹄疫病毒结构蛋白的单克隆抗体F104；

所述单克隆抗体F104包括重链可变区HV2和轻链可变区LV2；所述重链可变区HV2的氨基酸序列如SEQ ID No.1所示；所述轻链可变区LV2的氨基酸序列如SEQ ID No.2所示。