[发明专利]定量Khib的试剂在IgA肾病中的应用

说明书

本发明提供一种定量蛋白质中赖氨酸2‑羟基异丁酰化修饰水平的试剂在制备IgA肾病的诊断和/或预后的试剂中的应用。本发明从蛋白质组学的视角进行系统深入地研究IgAN，首次对人群中正常人和IgAN患者的2‑羟基异丁酰化图谱进行了探讨，发现正常人和IgAN患者的组蛋白赖氨酸2‑羟基异丁酰化修饰存在明显的区别，并且从中分析出了具有差异表达的2‑羟基异丁酰化位点，获得与IgAN相关的关键标志物，以此可以作为相应的诊断标志物使用。

技术领域

本发明涉及免疫疾病技术领域，尤其是涉及一种定量赖氨酸2-羟基异丁酰化修饰的试剂在IgA肾病中的应用。

背景技术

IgA肾病(IgA nephropathy，IgAN)，是一组免疫病理学诊断名称，1968年首先由J.Berger和N.HinqlaisLl报道，又称Berger病，是由多种病因引起的肾小球肾炎，在免疫荧光或免疫组化下IgA或以IgA为主的免疫复合物不同程度局限性或弥漫性沉积于肾小球系膜区或毛细血管壁引起一系列临床及病理改变的疾病，是肾小球源性血尿最常见的病因，是目前世界范围内最常见的原发性肾小球疾病，约占全部肾活检病理的10～40％、原发性肾小球疾病的20～50％，在亚洲地区最高，也是我国最常见的肾小球疾病，是导致终末期肾病(end-stage renaldisease，ESRD)的主要病因之一。

IgAN好发于青壮年，男性多于女性。其病因和发病机制均尚未完全清楚，有关研究表明IgAN是一种多基因、多因素决定的复杂性疾病。临床表现多种多样，临床上主要以反复肉眼血尿或镜下血尿为首发症状，可伴不同程度的蛋白尿，其临床表现多样，几乎涵盖了所有肾小球肾炎的临床特征。确诊依赖于肾活检病理，病理表现主要以系膜增生性肾小球肾炎为主，病变程度轻重不一。Gutierrez E研究示肉眼血尿可能会诱发IgAN的急性肾衰竭，其中高达25％的伴有肉眼血尿的急性肾衰竭患者不能恢复到基础的肾功能水平。YamagataK研究表明年龄大于40岁的蛋白尿患者更易发展成肾功能不全。此外，预后也不尽相同。有资料显示40％的IgA病人从无症状到终末期肾病只需几月至几年。

目前IgAN的发病机理并未完全阐明，免疫调节异常是目前研究的热点和重点。表观遗传机制对免疫系统的正常发育和功能发挥具有重要作用，外界因素的影响使表观遗传在免疫反应中出现不平衡可致基因异常表达，免疫功能紊乱，从而导致自身免疫性疾病的发生。表观遗传的两个主要机制为DNA甲基化和组蛋白修饰，进而对染色质结构的改变、基因转录和复制产生重要影响。

蛋白质的翻译后修饰是细胞调节蛋白质功能和生命过程的重要手段。通过蛋白水解方式，或在一个或多个氨基酸中添加修饰基团的方式改变共价键，蛋白质翻译后修饰(PTMs)就可以改变蛋白质的特性。根据DNA编码能力，我们预测翻译后修饰的数量大大超过了蛋白的数量。目前已发现200多种不同类型的翻译后修饰，这些修饰动态调控着各种生物事件，如亚细胞定位、蛋白降解、蛋白-蛋白相互作用、构象变化、信号转导和基因转录。

组蛋白的翻译后修饰作为表观遗传的重要方面，是细胞调控基因转录的重要方式。同一种翻译后修饰可以发生在不同的组蛋白位点上，同一个组蛋白位点可以发生不同的翻译后修饰，这些组蛋白的翻译后修饰以及翻译后修饰之间的相互关系构成了“组蛋白密码”。

近年来，随着质谱技术的进步，新的蛋白翻译后修饰不断被发现，包括新的位点和新的修饰类型。其中，对蛋白质赖氨酸残基的酰化修饰，即赖氨酸酰化，被认为是最广泛分布的翻译后修饰之一，涉及基因转录、能量代谢和信号传导。在过去的5年中，得益于质谱法和泛抗体富集法这些研究方法的发展，赖氨酸酰化的最新研究也取得了突飞猛进的进展。在种类方面，除了赖氨酸的乙酰化，新的组蛋白酰化修饰不断被发现，例如丙酰化、丁酰化、丙二酰化、琥珀酰化、巴豆酰化、2-羟基异丁酰化等等。到目前为止，这些新的赖氨酸的翻译后修饰在生物领域引起了极大的关注，对这些新发现的修饰的蛋白组学和酶类的研究将极大促进我们对这些修饰的功能和调控的认识。