[发明专利]环状RNA circ-01477及其应用

说明书

本发明公开了一种环状RNA circ‑01477及其在制备促进神经再生和修复神经损伤药物中的应用。研究结果表明通过下调或者抑制机体circ‑01477的表达，抑制星形胶质细胞的增殖和迁移，进而有利于中枢神经损伤修复。

技术领域

本发明属于神经再生和修复技术领域，具体涉及一种环状RNA circ-01477在制备促进神经再生和修复神经损伤药物中的应用。

背景技术

脊髓损伤是神经损伤中比较严重的一类，会导致永久的运动和感觉失常，影响人们生活质量。脊髓损伤后机体会发生一系列细胞和分子水平上的变化，涉及多种细胞，包括星形胶质细胞、少突细胞、小胶质细胞、血管内皮细胞等，影响轴突损伤后的再生微环境。其中星形胶质细胞在脊髓损伤后增生，进而在损伤处形成胶质疤痕，阻碍轴突再生和神经环路重塑。此外，胶质疤痕也可以限制炎症反应扩散到周围组织，修复受损的血脑屏障，维持局部微环境。因此星形胶质细胞在脊髓损伤后发挥着重要的作用。

环状RNA circular RNAs(circRNAs)是一类不具有5'末端帽子和3'末端poly(A)尾巴、并以共价键形成环形结构的RNA.，可以调节基因表达，参与多种生物学过程。目前关于circRNAs的研究主要集中在癌症方面。在神经系统发育中circRNAs也发挥着重要的作用，可以影响神经元的迁移和轴突生长。但到目前为止circRNAs在中枢神经系统损伤修复中的作用鲜有报道，尤其是对星形胶质细胞的表型调节。

发明内容

本发明目的在于提供一种新的大鼠源的环状RNA circ-01477及其用途，可用于制备促进神经再生和修复神经损伤药物。

本发明具体技术方案如下：

一种环状RNA circ-01477，所述circRNA的cDNA核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示，首尾连接成环状结构。

本发明另一目的在于提供上述环状RNA circ-01477在制备促进神经再生和修复神经损伤药物中的应用，所述神经损伤为中枢神经系统脊髓损伤。

可根据circ-01477核苷酸序列设计干预circ-01477表达的物质，选自化合物、蛋白、多肽、多糖、糖蛋白、糖肽、核酸中的一种或几种。

优选的，所述干预circRNA表达的物质，选自与circ-01477环化位点处的序列互补的siRNA。

本发明另一目的在于提供一种干预上述circ-01477表达的siRNA，核苷酸序列如下：

circ-01477 siRNA正义链:5’-cgaggggcuacacuugcca dTdT-3’(SEQ ID NO:4)。

circ-01477 siRNA反义链:5’-uggcaaguguagccccucg dTdT-3’(SEQ ID NO:5)。

本发明研究结果表明，所述siRNA能够干扰circ-01477的表达，抑制星形胶质细胞增殖和迁移。

本发明另一目的在于提供上述干预circ-01477表达的siRNA在制备促进神经再生和修复神经损伤药物中的应用。

本发明构建大鼠脊髓损伤半切模型，取损伤不同时间点的脊髓组织，通过RNA-seq及生物信息学分析，挑选损伤后表达变化明显的circRNAs。针对筛选到的circRNAs设计特异性的背向引物，再通过PCR验证以及测序鉴定，获得一种新的环状RNA circ-01477。在原代星形胶质细胞中，设计siRNA干扰circ-01477的表达，可以抑制星形胶质细胞增殖和迁移。

附图说明

图1为实施例1所述circ-01477在大鼠脊髓损伤后脊髓组织中不同时间点的表达变化(以GAPDH为内参)。