[发明专利]橙光碳点的制备及其对Fe

权利要求书

1.一种橙光碳点的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)将反应原料间苯二酚、尿素和N,N-二甲基甲酰胺加入到反应釜中，超声分散，于烘箱中加热到120-240℃，保温1-24小时，自然冷却至室温，得到红色溶液；间苯二酚和尿素的摩尔比为1：(0.1-2)；

(2)将反应液取出，置于离心管中，除去大颗粒的不溶物，得到碳点溶液；

(3)将步骤2中得到的碳点溶液移到透析袋中(截留分子量为3KDa)；透析48小时；

(4)将透析后的碳点溶液移入离心管中，先冷冻，然后将其放入冷冻干燥机中，冷冻干燥一段时间后得到橙光碳点的固体粉末。

2.按照权利1要求所述的制备方法，其特征在于，间苯二酚与尿素的摩尔比为1：(0.6-1)。

3.按照权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤(1)120-200℃烘箱中反应4-18小时。

4.按照权利1要求所述的制备方法，其特征在于，每28毫克间苯二酚对应5-10毫升N,N-二甲基甲酰胺。

5.按照权利1-4任一项方法制备得到的橙光碳点。

6.一种橙光碳点检测三价铁离子的方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)将体积相同但浓度不同的三价铁离子溶液加入到一定浓度的橙光碳点溶液中，形成混合溶液；在混合溶液中，橙光碳点的浓度不变，三价铁离子的浓度范围为0-100μM；所述的碳点为按照权利要求1-4任一方法制备得到的橙光碳点；

(2)通过荧光分光光度计测试碳点的最佳激发波长，并将荧光分光光度计的激发波长调整为最佳激发波长，记录不同浓度的三价铁离子溶液的荧光强度；

(3)绘制碳点溶液随铁离子浓度的增加而荧光强度下降的变化曲线，选取其中的线性部分进行拟合并得出拟合公式；

(4)将待测三价铁离子溶液按照步骤(1)的方法配制碳点和三价铁离子混合溶液；按照步骤(2)的最佳激发波长通过荧光分光光度计测定荧光强度值，将所得荧光强度带入步骤(3)的拟合公式得到铁离子浓度。

7.按照权利要求6的方法，其特征在于，激发波长选为570nm。

8.一种橙光碳点定性检测细胞中三价铁离子的方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)将橙光碳点溶于缓冲液中，配成0-200μg/mL碳点缓冲液；所述的橙光碳点为按照权利要求1-4任一项方法制备得到的荧光碳点；

(2)将所得的细胞放入培养皿，加入胰酶然后将培养皿放入烘箱中培养几分钟。待细胞完全分散后，向培养皿中加入细胞培养液，用移液枪吹打，使细胞完全分散于培养液中。将细胞液放入离心管中，1000rpm离心5分钟。离心完成后去掉上清液，加入2毫升培养液重新分散，计算细胞密度；

(3)将步骤(2)中的细胞分散液取一定体积加入到6孔板中，每个孔加入5万个细胞，每个孔培养液的总体积为2毫升，放入培养箱中培养24小时。之后将细胞培养液替换为碳点缓冲液，放入培养箱中继续培养1-4小时；

(4)步骤(3)后用不含碳点的缓冲液对细胞洗涤3次，用800微升4％的甲醛溶液在室温下固定20分钟，之后用缓冲液冲洗三次。放到荧光显微镜下进行荧光成像。若是细胞中荧光完全淬灭，根据橙光碳点浓度与三价铁离子浓度关系曲线，可以定性的确定细胞中的三价铁离子浓度大于10μM。

9.按照权利要求8的方法，其特征在于，橙光碳点的浓度为20μg/mL。

10.按照权利要求8的方法，其特征在于，加入碳点缓冲液后放入培养箱中继续培养1小时。