[发明专利]一株多粘芽孢杆菌菌株及其应用

说明书

本发明公开了一株多粘芽孢杆菌菌株及其应用。本发明的多粘芽孢杆菌菌株，所述的多粘芽孢杆菌菌株为PBSZ123，保藏名称为多粘芽孢杆菌(Paenibacillus polymyxa)，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)，保藏单位地址是北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏日期：2019年8月14日；保藏编号：CGMCC No.18386。本发明的多粘芽孢杆菌从滇重楼内生菌中分离得到，对重楼病害的主要病原菌重楼灰霉菌、茎点霉叶斑病菌、重楼拟盘多毛孢菌具有良好的抑制作用。

技术领域

本发明涉及生物农药技术领域，具体涉及一株多粘芽孢杆菌菌株及其应用。

背景技术

近年来，随着中药资源需求量的急剧增长，中药野生资源破坏严重，野生转为栽培成为满足市场需求的必由之路。野生中药材很少发生病害，即使有也不会形成灾害，从野生变为人工栽培后，其生长环境发生变化，在农业生态系统中，种类单一，密度增加，且高水高肥、人为远程调种等管理措施创造了病害发生流行的条件，病害易于在种群内部、田块之间、地区之间蔓延传播，导致栽培药材病害加重。

滇重楼(Parispolyphyllavar.yunnanensis(Franch.)Hand)为延龄草(Trilliaceae)重楼属植物，是“云南白药”、“宫血宁”等著名中成药的原料药，根茎中含有的甾体化合物，具有止血、抗肿瘤、抗微生物和免疫调节等活性。重楼野生变家种后，其生存环境发生改变，各类病菌小种也随之改变，弱势小种变为优势小种，新病害不断增加。目前栽培重楼上主要的病害有：重楼茎点霉叶斑病菌(Phoma sp.)、灰霉菌(Botrytiscinerea)、细极链格孢菌(Alternaria tenuissima)等。

目前中药材的病害主要是通过化学药剂防治，农药的长期使用会造成环境污染、生态系统破坏、病原菌抗药性产生，甚至给中药材带来农药残留和重金属污染等危害，因此合理降低农药使用，找到绿色、环境友好型的防控方式，对防治中药材病害有重要的意义。

发明内容

针对目前重楼真菌病害发生严重，且化学农药防治效果效果不理想，同时带来环境污染的问题，提供一株高效防治重楼灰霉病、叶斑病的多粘芽孢杆菌(Paenibacilluspolymyxa)菌株及其应用。

为达到上述目的，本发明采用了下列技术方案：本发明的多粘芽孢杆菌菌株，所述的多粘芽孢杆菌菌株为PBSZ123，保藏名称为多粘芽孢杆菌(Paenibacilluspolymyxa)，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)，保藏单位地址是北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏日期：2019年8月14日；保藏编号：CGMCC No.18386。

进一步地，所述的多粘芽孢杆菌菌株的基因序列为SEQ ID No.1所示的16S核苷酸序列。

本发明所述的多粘芽孢杆菌菌株制备的多粘芽孢杆菌菌剂。

进一步地，其活性成分为如下(a)(b)(c)中的至少一种：

(a)所述的多粘芽孢杆菌菌株的发酵培养物；

(b)所述的多粘芽孢杆菌菌株细胞的超声裂解上清；

(c)所述的多粘芽孢杆菌菌株细胞的超声裂解沉淀。

本发明所述的多粘芽孢杆菌的发酵液的制备方法，包括如下步骤：

将所述的多黏芽孢杆菌菌株接种于牛肉膏蛋白胨培养基NA培养基平皿中，28℃倒置培养2天，活化菌株，挑取菌株接种到牛肉膏蛋白胨培养基NA液体培养基中，，置于温度为28℃、转速为200r/min条件下培养2天，制得多粘芽孢杆菌发酵液。