[发明专利]一种硫烯醚化合物及其合成方法和在多肽环化中的应用

权利要求书

1.一种硫烯醚化合物，其特征在于结构通式如下：

其中，n为2～5，X为氯或溴。

2.制备权利要求1所述的一种硫烯醚化合物的合成方法，其特征在于包括以下步骤：

1)以对氯甲酰基苯甲酸甲酯、间氯甲酰基苯甲酸甲酯或邻氯甲酰基苯甲酸甲酯为原料，在氢化钠作用下与丙二腈缩合，形成烯醇；

2)在氢氧化钠作用下，发生水解反应，得到羧酸中间体；

3)在五氯化磷作用下，发生氯代反应，形成氯代烯烃；

4)在碳酸氢钠作用下，以乙硫醇取代得到硫烯醚化合物；

5)使用碳二亚胺及N-羟基琥珀酰亚胺活化，得到活性酯中间体；

6)活性酯中间体与直链烷烃二胺和卤代乙酰卤反应得到的酰胺缩合，并在碳酸氢钠作用下，以N-乙酰半胱氨酸取代得到目标产物；

合成路线如下：

3.权利要求1所述的一种硫烯醚化合物在多肽环化中的应用，其特征在于：所述硫烯醚化合物对含有一个氮端半胱氨酸及一个链内半胱氨酸的多肽进行环化，从而构建环肽。

4.如权利要求3所述的一种硫烯醚化合物在多肽环化中的应用，其特征在于：将所述多肽、硫烯醚化合物、N-乙酰-L-半胱氨酸及三(2-羧乙基)膦加入至磷酸缓冲液中反应，从而将多肽环化。

5.如权利要求4所述的一种硫烯醚化合物在多肽环化中的应用，其特征在于：所述多肽、硫烯醚化合物、N-乙酰-L-半胱氨酸及三(2-羧乙基)膦的摩尔比为1:(1～10):(1～20):(1～20)；反应温度为20～40℃，反应时间为60～720min；磷酸缓冲液的pH为6.0～9.0。

6.如权利要求5所述的一种硫烯醚化合物在多肽环化中的应用，其特征在于：所述多肽、硫烯醚化合物、N-乙酰-L-半胱氨酸及三(2-羧乙基)膦的摩尔比为1:2:4:4；反应时间为60～120min；磷酸缓冲液的pH为7.4。

7.如权利要求3所述的一种硫烯醚化合物在多肽环化中的应用，其特征在于：所述多肽的氮端为氨基。

8.如权利要求7所述的一种硫烯醚化合物在多肽环化中的应用，其特征在于：所述多肽表示为C(Xaa)aC(Xaa)b，C为半胱氨酸，Xaa选自甘氨酸、丙氨酸、缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、苯丙氨酸、色氨酸、酪氨酸、天冬氨酸、天冬酰胺、谷氨酸、赖氨酸、谷氨酰胺、甲硫氨酸、丝氨酸、苏氨酸、脯氨酸、组氨酸、精氨酸；a取自1～30，b取自0～29，且a与b之和为30。

9.如权利要求4所述的一种硫烯醚化合物在多肽环化中的应用，其特征在于：利用基于该硫烯醚化合物的环化方法在磷酸缓冲液中对噬菌体表面展示的多肽进行翻译后修饰，从而构建展示环肽的噬菌体库。

10.如权利要求9所述的一种硫烯醚化合物在多肽环化中的应用，其特征在于：向磷酸缓冲液中滴加于氮端展示多肽的噬菌体库，加入三(2-羧乙基)膦于20～40℃下孵育15～60min钟，之后加入N-乙酰-L-半胱氨酸及所述硫烯醚化合物，均匀混合后，于20～40℃孵育60～720min，然后加入冰的PEG/NaCl水溶液沉淀噬菌体，并置于冰中一段时间，最后通过离心得到噬菌体沉淀并以1×磷酸盐缓冲液重悬，得到环化的噬菌体库。