[发明专利]与花生冠腐病抗性相关的分子标记及其应用有效
| 申请号： | 201911028889.3 | 申请日： | 2019-10-25 |
| 公开（公告）号： | CN110669862B | 公开（公告）日： | 2022-09-09 |
| 发明（设计）人： | 朱晓峰;倪皖莉;赵西拥;姜涛;王嵩;汪清 | 申请（专利权）人： | 安徽省农业科学院作物研究所 |
| 主分类号： | C12Q1/6895 | 分类号： | C12Q1/6895;C12N15/11 |
| 代理公司： | 北京市京大律师事务所 11321 | 代理人： | 李洪群 |
| 地址： | 230001 安*** | 国省代码： | 安徽;34 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 花生 冠腐病 抗性 相关 分子 标记 及其 应用 | ||
1.与花生冠腐病抗性相关的分子标记的特异性PCR引物，其特征在于，包括SEQ ID NO:1所示的上游引物和SEQ ID NO:2所示的下游引物。
2.含有权利要求1所述引物的检测试剂或试剂盒。
3.权利要求1所述引物或权利要求2所述检测试剂或试剂盒在抗冠腐病花生品种的鉴定及选育中的应用。
4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，包括如下步骤：
(1)提取待测花生的基因组DNA；
(2)以步骤(1)提取的DNA为模板，利用SEQ ID NO:1所示的上游引物和SEQ ID NO:2所示的下游引物进行PCR扩增；
(3)分析扩增产物。
5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，PCR反应体系为：含25 mM Mg2+的10×反应缓冲液1.0μl，2.5mM dNTPs 0.8μl，5U/μl Taq DNA聚合酶0.1μl，10μM上、下游引物各0.2μl，DNA50ng，ddH2O补齐至总体积10μl。
6.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，PCR反应条件为：95℃预变性5 min；第1个循环是95℃变性50 s，50℃退火40 s，72℃延伸30 s，然后退火温度每个循环降0.3℃，共38个循环；最后72℃延伸8 min。
7.根据权利要求4-6任一项所述的应用，其特征在于，步骤(3)包括：扩增产物经琼脂糖凝胶电泳检测，若扩增得到大小分别为172bp和354bp的两条特征条带，则待测花生为抗冠腐病花生材料，若扩增仅得到大小为172bp的一条特征条带，则待测花生为不抗冠腐病花生材料。
8.根据权利要求4-6任一项所述的应用，其特征在于，所述冠腐病由黑曲霉（Aspergillus niger）所致。
9.权利要求1所述引物或权利要求2所述检测试剂或试剂盒在花生分子标记辅助育种中的应用。
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