[发明专利]一种用于定量测定四环素和诺氟沙星的时间分辨荧光免疫试纸条

权利要求书

1.一种用于定量测定四环素和诺氟沙星的时间分辨荧光免疫试纸条，其特征在于，顺次包括加样区、结合区和检测区，所述检测区顺次包括第1检测线、第2检测线和质控线，所述第1检测线包被有四环素人工抗原或诺氟沙星人工抗原，所述第2检测线包被有诺氟沙星人工抗原或四环素人工抗原，所述结合区平铺有Eu-时间分辨荧光纳米微球标记的抗体Eu-四环素单抗和Eu-诺氟沙星单抗；

所述四环素人工抗原的喷涂浓度为0.5～1.5mg/mL；

所述四环素人工抗原的喷涂用量为1.5～2.5uL/cm；

所述诺氟沙星人工抗原的喷涂浓度为0.5～1.5mg/mL；

所述诺氟沙星人工抗原的喷涂用量为1.5～2.5uL/cm；

所述抗体Eu-四环素单抗的喷涂浓度为0.5～1.5mg/mL；

所述抗体Eu-四环素单抗的喷涂用量为4.5～5.5uL/cm；

所述Eu-诺氟沙星单抗的喷涂浓度为0.5～1.5mg/mL；

所述Eu-诺氟沙星单抗的喷涂用量为4.5～5.5uL/cm；

所述诺氟沙星人工抗原或四环素人工抗原为小分子偶联载体蛋白；

所述小分子偶联载体蛋白的制备方法为：

(1)分别称取四环素和诺氟沙星药物溶于1mL 0.2mol/LNaOH溶液中，四环素和诺氟沙星与氢氧化钠为等摩尔量；

(2)将500μL 1％NaNO₂溶液加入至(1)中的四环素和诺氟沙星药物溶液中，4℃水浴预冷；

(3)将(2)中溶液避光搅拌下滴加至1.5mL的0.2mol/L HCl溶液中，4℃水浴，反应3h；

(4)将100mg BSA溶于10mL 0.01mol/L的pH为7.2～7.6的PBS，将50mg HSA溶于10mL0.01mol/L的pH为7.2～7.6的PBS中置于4℃水浴预冷；

(5)将(4)滴加至(3)，调节pH为8.0，4℃反应过夜；

(6)将(5)所得反应产物于PBS中透析72h；

(7)将透析产物分装于-20℃保存。

2.根据权利要求1所述的时间分辨荧光免疫试纸条，其特征在于，相邻两条检测线之间的距离为8～12mm。

3.根据权利要求1所述的时间分辨荧光免疫试纸条，其特征在于，邻近质控线的检测线与质控线的距离为8～12mm。

4.根据权利要求1所述的时间分辨荧光免疫试纸条，其特征在于，所述Eu-时间分辨荧光纳米微球的发光物质为铕；

所述Eu-时间分辨荧光纳米微球的表面基团为聚苯乙烯-羧基。

5.根据权利要求1所述的时间分辨荧光免疫试纸条，其特征在于，所述Eu-时间分辨荧光纳米微球的粒径为90～110nm；

所述Eu-时间分辨荧光纳米微球的激发光波长为340～360nm；所述Eu-时间分辨荧光纳米微球的发射光波长为610～630nm。