[发明专利]一种适用于制作马属动物卵巢石蜡切片的方法在审
申请号: | 201911033369.1 | 申请日: | 2019-10-28 |
公开(公告)号: | CN110926907A | 公开(公告)日: | 2020-03-27 |
发明(设计)人: | 格日乐其木格;神英超;陶力;王希生;白东义;赵一萍;张心壮;李蓓;芒来 | 申请(专利权)人: | 内蒙古农业大学 |
主分类号: | G01N1/30 | 分类号: | G01N1/30;G01N1/36;G01N1/28;G01N1/04 |
代理公司: | 北京知呱呱知识产权代理有限公司 11577 | 代理人: | 杜立军 |
地址: | 010018 内蒙古自*** | 国省代码: | 内蒙古;15 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 适用于 制作 动物 卵巢 石蜡 切片 方法 | ||
本发明实施例公开了一种适用于制作马属动物卵巢石蜡切片的方法,涉及生物学研究技术领域,所述方法包括如下步骤:取样固定、脱水、透明、浸蜡、抽气、包埋和切片制作。本发明实施例一种适用于制作马属动物卵巢石蜡切片的方法增加了抽气过程,有效的去除了浸蜡过程中马属动物卵巢组织内部存在的气泡,并能极大程度上保持了卵泡的完整性,获得了良好的浸蜡和包埋效果,制作出的马属动物卵巢石蜡切片能有效的保护马属动物卵巢的组织结构的完整性,能获得较好的染色效果。
技术领域
本发明实施例涉及生物学研究技术领域,具体涉及一种适用于制作马属动物卵巢石蜡切片的方法。
背景技术
石蜡切片是组织学观察中最为基础的一种制作切片的方法,作为传统的生物学研究技术,石蜡切片不但可以进行正常组织细胞形态学方法的观察,而且在病理学、免疫学、细胞原位核酸分子杂交、形态计量领域方面应用也非常广泛。石蜡切片需要经过固定、脱水、透明、透蜡、包埋、切片、贴片、脱蜡、染色、透明以及封片等步骤来使其组织细胞保持原有的结构并可以清楚观察和分析。
由于马属动物的卵巢组织结构和性质与其他动物的器官组织有很大的差别,主要表现在其卵巢外部包裹一层白色的系膜髓质,而且在卵巢内部有较大的卵泡,卵泡内含有较多液体,排卵窝组织排列紧密,致使现存的适用于动物组织的石蜡切片制作方法和试剂不适用于马属动物的卵巢组织,不能制作出质量很好的卵巢切片。
发明内容
为此,本发明实施例提供一种适用于制作马属动物卵巢石蜡切片的方法,以解决现有技术中由于马属动物的卵巢组织结构和性质的特殊性而导致的现存的适用于动物组织的石蜡切片制作方法不适用于马属动物的卵巢组织的问题。
为了实现上述目的,本发明实施例提供如下技术方案:
根据本发明实施例的第一方面,一种适用于制作马属动物卵巢石蜡切片的方法,所述方法包括如下步骤:取样固定、脱水、透明、浸蜡、抽气、包埋和切片制作;所述取样固定采用的固定液为卡诺氏固定液。
进一步地,所述取样固定的具体步骤为:取马属动物试验品经颈动脉放血致死后开膛取出卵巢,剪去卵巢系膜、卵巢髓质得卵巢组织,将所述卵巢组织采用固定液在-4℃条件下固定24h。
进一步地,所述脱水的具体步骤为:将取样固定后的卵巢组织依次经过浓度为75%的酒精、浓度为85%的酒精、浓度为95%的酒精、浓度为100%的酒精逐级脱水,其中,浓度为75%的酒精脱水时间为24h以上,浓度为85%的酒精脱水时间为2h,浓度为95%和100%的酒精的脱水次数均为两次且每次脱水时间为1h。
进一步地,所述透明的具体步骤为:将脱水后的卵巢组织放置于二甲苯透明剂中浸泡两次,每次浸泡时间为20-30min。
进一步地,所述浸蜡的具体步骤为:将透明后的卵巢组织放置于软蜡中浸蜡三次,其中,第一次浸蜡的时间为1h,第二次和第三次浸蜡的时间均为40min。
进一步地,所述抽气在所述浸蜡过程中进行;所述抽气的压力为0.01-0.05MPa。
进一步地,所述包埋的具体步骤为:取用硬蜡铺底后的锡纸盒,在所述锡纸盒中先放入抽气后的卵巢组织,再倒入软蜡,然后于阴凉处静置12小时。
进一步地,所述卡诺氏固定液由冰醋酸:氯仿:无水乙醇按1:3:6的体积比配置而成。
本发明实施例具有如下优点:
1、本发明实施例一种适用于制作马属动物卵巢石蜡切片的方法增加了抽气过程,能促进二甲苯与软蜡的交换,有效的去除了浸蜡过程中马属动物卵巢组织内部存在的气泡,并能极大程度上保持了卵泡的完整性,获得了良好的包埋效果,有利于切片的制作。
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