[发明专利]一种用于镉离子检测的便携式荧光传感平台及检测方法有效
申请号: | 201911035710.7 | 申请日: | 2019-10-29 |
公开(公告)号: | CN110940645B | 公开(公告)日: | 2021-10-19 |
发明(设计)人: | 王平;王心怡;孔留兵;甘颖 | 申请(专利权)人: | 浙江大学 |
主分类号: | G01N21/64 | 分类号: | G01N21/64;G01N1/38 |
代理公司: | 杭州求是专利事务所有限公司 33200 | 代理人: | 刘静 |
地址: | 310058 浙江*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 用于 离子 检测 便携式 荧光 传感 平台 方法 | ||
1.一种基于便携式荧光传感平台的镉离子荧光检测的方法,其特征在于,该方法通过便携式荧光传感平台实现,该平台包括:平台机壳、智能手机、智能手机卡槽、智能手机摄像头、微距镜头、光学滤光片、微流控芯片、第一不锈钢管、第二不锈钢管、第一紫外LED、第二紫外LED、供电电路板、Micro-USB充电口、开关、注射泵、注射器、废液缸和微流控芯片卡槽;
所述便携式荧光传感平台具有供电电路板,供电电路板上具有Micro-USB充电口;平台机壳底部固定有微流控芯片卡槽,用于放置微流控芯片,微流控芯片两侧安装第一紫外LED和第二紫外LED,并由供电电路板供电,通过平台机壳侧面的开关控制紫外LED的开与关;微流控芯片由载玻片和PDMS加工的腔体构成,腔体两端插入第一不锈钢管和第二不锈钢管,第一不锈钢管连接注射泵上的注射器控制液体的输入,第二不锈钢管连接废液缸控制液体输出;平台机壳的上方具有智能手机卡槽,智能手机水平放置于智能手机卡槽中;平台机壳顶部上开有圆孔,所述圆孔在微流控芯片的腔体的正上方,圆孔下方依次粘贴微距镜头和光学滤光片;智能手机摄像头在圆孔正上方,通过该圆孔可对微流控芯片的PDMS加工的腔体中的样品进行图像采集;
镉离子荧光检测方法包括以下步骤:
(1)镉离子检测溶液的配制:将4740μl 10mM pH=8.5的Tris-HCl缓冲溶液,660μl的100µM EDTA和600μl 4µM的CdTe/CdS量子点QDs依次添加到10mL试管中,并将溶液混合均匀;将试管密封,并放置在黑色避光处于室温条件下反应10分钟得到EDTA-CdTe/CdS QDs混合溶液;
(2)Cd2+加标溶液配制:通过引入不同浓度水平的Cd2+制备所有样品,获取掺加不同浓度水平的Cd2+的加标样品;并用10mM pH=8.5的Tris-HCl缓冲液调节加标样品溶液pH=8.5;
(3)确定检测镉离子的最佳标定曲线:取500μl步骤(1)中准备好的EDTA-CdTe/CdS QDs溶液加入不同浓度水平等体积的 Cd2+加标溶液中,并将上述溶液充分混合,黑色避光反应20分钟;将反应好的最终溶液依次抽取到一次性注射器中,并打开平台机壳侧面的开关;将一次性注射器放到注射泵上,一次性注射器通过接头连接到便携式荧光传感平台的注射口,便携式荧光传感平台的出口连接到废液缸中;通过智能手机对每个样品进行图像采集,采集完所有图像后,对每一幅采集的图像进行处理,样品图像的采集及处理过程包括以下子步骤:
(3.1)打开智能手机的摄像头,设置为专业拍照模式,设置手机摄像参数;
(3.2)启动注射泵,设置注射泵参数,当溶液注射进入便携式荧光传感平台的微流控芯片的腔体时,在上述摄像参数下使用智能手机进行图像采集,对于每个样品以一定的时间间隔连续采集n张照片;每个样品的图像采集完成之后;使用装有空气的注射器进行清洗;
(3.3)采集完所有样品的图像后,对每一幅采集的图像进行处理;具体为选取每张照片中腔体部分m*m个像素点的中心区域,选取RGB通道的G通道进行分析,对m*m个像素点的G值取均值得到荧光强度值Ig;基于上述处理过程,每个样品采集得到的n张图像经过分析,得到n个荧光强度Ig值,将n个荧光光强度Ig值取平均,得到值;将各个样品分析得到的值减去对照组Tris-HCl缓冲液对应的Ig-tris值之后得到值I,即I= -Ig-tris,将未加入Cd2+的EDTA-CdTe/CdS QDs溶液作为空白组通过计算得到的值记为I0;再以比值I/I0作为指标,绘出镉离子浓度与比值I/I0的曲线;然后,根据最小二乘法拟合曲线算法,拟合出镉离子浓度与比值I/I0的线性关系,得到镉离子浓度的最佳标定曲线;
(4)检测未知浓度水溶液中的镉离子浓度:将未知浓度的待测样品溶液用10mM pH=8.5的Tris-HCl缓冲液调节溶液pH=8.5后加入到EDTA-CdTe/CdS QDs溶液中,重复步骤(1)-步骤(3),得到该待测样品溶液对应的荧光强度比值I/I0,带入步骤(3)得到的检测镉离子浓度的最佳标定曲线,计算出待测样品溶液的镉离子浓度。
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