[发明专利]一种蝉花抗癌活性核苷类化合物CCN1的制备方法

权利要求书

1.一种蝉花抗癌活性核苷类化合物CCN1的制备方法，其特征在于：

1)将蝉花处理获得蝉花粉；

2)取蝉花粉加入乙醇溶液并进行超声处理；

3)超声处理后的溶液依次进行水浴回流和抽滤处理，然后离心处理收集上清液；

4)上清液浓缩后冷冻干燥，得到粗核苷类化合物；

5)用双蒸馏水将粗核苷类化合物溶解，离心取上清液后，过滤膜再上NKA-Ⅱ型大孔吸附树脂柱吸附处理；

6)用乙醇溶液洗脱后收集洗脱峰的洗脱液，浓缩并冷冻干燥后得到核苷类化合物干燥物；

7)用双蒸馏水将核苷类化合物干燥物溶解，离心取上清液后，过滤膜再上SP-Sepharose Fast Flow阳离子交换柱，用NaCl水溶液进行梯度洗脱，收集水相洗脱峰的洗脱液，冷冻干燥后得到均一的核苷类化合物，取名CCN1。

2.根据权利要求1所述的一种蝉花抗癌活性核苷类化合物CCN1的制备方法，其特征在于方法的工艺条件具体为：

1)蝉花于-50℃下真空干燥36h，于-15℃下超微粉碎5min，过80～100目筛，得到蝉花粉；

2)取蝉花粉，加入乙醇溶液，混匀后，在30℃下用超声波清洗仪以500W功率53KHz频率的超声波磁场作用30min；

3)于100℃水浴中回流提取3次，共2.0h，集中收集三次的提取液，三次提取液经过合并后用抽滤机进行抽滤处理，弃掉滤渣，将滤液用高速离心机于10000rpm下离心5min，弃掉沉淀，收集上清液；

4)上清液用旋转蒸发仪浓缩后，-50℃下真空干燥，得到粗核苷类化合物；

5)用双蒸馏水溶解粗核苷类化合物并调整质量浓度为5.0～6.0mg/mL，将溶液在8000rpm下离心10min，取上清液，过0.45μm滤膜，上NKA-Ⅱ型大孔吸附树脂柱吸附，用5倍柱体积的去离子水充分冲洗；

6)用质量分数为75％的乙醇溶液于2.0～3.0mL/min流速下洗脱，自动收集器收集，用紫外分光光度计于254nm波长测定，收集合并具有核苷类化合物洗脱峰的洗脱液，用旋转蒸发仪浓缩后，-50℃下真空干燥，得到核苷类化合物干燥物；

7)用双蒸馏水溶解核苷类化合物干燥物并调整质量浓度为2.0～2.5mg/mL，将溶液在8000rpm下离心10min，取上清液，过0.45μm滤膜，上SP-Sepharose Fast Flow阳离子交换柱，用0-0.5mol/L浓度梯度的NaCl水溶液进行梯度洗脱，洗脱流速为1.0-1.3mL/min，收集水相洗脱峰的洗脱液，用旋转蒸发仪浓缩后，-50℃下真空干燥，得到均一的核苷类化合物，取名CCN1。

3.根据权利要求1所述的一种蝉花抗癌活性核苷类化合物CCN1的制备方法，其特征在于：所述步骤2)中，按W：V为1:20配比加入蝉花粉和质量分数为85％的乙醇溶液。

4.一种权利要求1所述方法制备成的蝉花抗癌活性核苷类化合物CCN1的应用，其特征在于：所述蝉花抗癌活性核苷类化合物CCN1用于制备抗癌药物。

5.根据权利要求4所述的蝉花抗癌活性核苷类化合物CCN1的应用，其特征在于：所述抗癌药物为抗击人胃癌细胞SGC-7901的药物。