[发明专利]检测人肠道细菌的组合物、试剂盒及方法

权利要求书

1.一种检测肠道细菌的组合物，所述肠道细菌由双歧杆菌属、链球菌属、拟杆菌属、乳酸菌属、柔嫩梭菌、普拉梭菌和直肠真杆菌组成，所述组合物包括：

BIF的检测试剂：如SEQ ID NO:1所示的BIF上游引物、如SEQ ID NO:2所示的BIF下游引物和如SEQ ID NO:5所示的BIF探针；

STR的检测试剂：如SEQ ID NO:3所示的STR上游引物、如SEQ ID NO:4所示的STR下游引物和如SEQ ID NO:6所示的STR探针；

LAC的检测试剂：如SEQ ID NO:7所示的LAC上游引物、如SEQ ID NO:8所示的LAC下游引物和如SEQ ID NO:11所示的LAC探针；

BAC的检测试剂：如SEQ ID NO:9所示的BAC上游引物、如SEQ ID NO:10所示的BAC下游引物和如SEQ ID NO:12所示的BAC探针；

FAE的检测试剂：如SEQ ID NO:13所示的FAE上游引物、如SEQ ID NO:14所示的FAE下游引物和如SEQ ID NO:19所示的FAE探针；

CLEP的检测试剂：如SEQ ID NO:15所示的CLEP上游引物、如SEQ ID NO:16所示的CLEP下游引物和如SEQ ID NO:20所示的CLEP探针；以及

ER的检测试剂：如SEQ ID NO:17所示的ER上游引物、如SEQ ID NO:18所示的ER下游引物和如SEQ ID NO:21所示的ER探针；

其中，所述组合物以3个试剂组合的形式存在：

试剂组合1：FAE的检测试剂、CLEP的检测试剂和ER的检测试剂；

试剂组合2：BIF的检测试剂、STR的检测试剂、LAC的检测试剂和BAC的检测试剂中的任意两种；以及

试剂组合3：其余两种检测试剂。

2.根据权利要求1所述的组合物，其中，所述组合物以3个试剂组合的形式存在：

试剂组合1：FAE的检测试剂、CLEP的检测试剂和ER的检测试剂；

试剂组合2：LAC的检测试剂和BAC的检测试剂；以及

试剂组合3：BIF的检测试剂和STR的检测试剂。

3.根据权利要求2所述的组合物，其中，所述试剂组合1中的各探针的荧光基团彼此不同；所述试剂组合2中的各探针的荧光基团彼此不同；所述试剂组合3中的各探针的荧光基团彼此不同。

4.根据权利要求3所述的组合物，其中，所述试剂组合中的探针的荧光报告基团选自FAM、HEX、ROX、VIC、CY5、5-TAMRA、TET、CY3和JOE。

5.根据权利要求4所述的组合物，其中，如SEQ ID NO:5、11、19所示的探针的荧光基团为FAM，如SEQ ID NO:6、12、20所示的探针的荧光基团为HEX；SEQ ID NO:21所示的探针的荧光基团为ROX。

6.权利要求1~5中任一项所述的组合物在制备检测人肠道细菌的试剂盒中的用途。

7.一种用于检测人肠道细菌的试剂盒，所述试剂盒包括上述权利要求1~5中任一项所述的组合物。

8.根据权利要求7所述的试剂盒，其中，所述试剂盒还包括核酸提取试剂、dNTP、Mg²⁺、DNA聚合酶、PCR缓冲液中的至少一种。

9.根据权利要求8所述的试剂盒，其中，各组分的终浓度的范围如下所示：Mg²⁺ 2~6mM、dNTP 0.1~0.4mM、DNA聚合酶2~30U、引物100~500nM、探针50~250nM。