[发明专利]一种倾斜式三维扫描显微成像系统及方法在审
申请号: | 201911040052.0 | 申请日: | 2019-10-29 |
公开(公告)号: | CN111220615A | 公开(公告)日: | 2020-06-02 |
发明(设计)人: | 李宁;吕晓华;曾绍群;华乐;刘晓翔;张勇升 | 申请(专利权)人: | 怀光智能科技(武汉)有限公司;华中科技大学 |
主分类号: | G01N21/84 | 分类号: | G01N21/84;G01N21/64;G02B21/00;G02B21/36 |
代理公司: | 武汉东喻专利代理事务所(普通合伙) 42224 | 代理人: | 宋敏 |
地址: | 430074 湖北省武汉市东湖开发区关山二路*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 倾斜 三维 扫描 显微 成像 系统 方法 | ||
1.一种倾斜式三维扫描显微成像系统,其特征在于:包括面阵相机(1)、筒镜(2)、显微物镜(3)、样品夹具(5)、三维电动平移台(6)、三维电动平移台控制器(8)、计算机(9)、图像处理器(10);
所述显微物镜(3)与所述筒镜(2)成共轴关系,所述三维电动平移台控制器(8)与三维电动平移台(6)以及计算机(9)通过网口通讯相连接,所述面阵相机(1)通过所述图像处理器(10)与计算机(9)相连接;
所述三维电动平移台(6)以及所述样品夹具(5)相对平行,样品平面与显微物镜的焦平面不平行、构成一个倾斜夹角θ,所述三维电动平移台(6)带动样品(4)在样品平面上进行倾斜式扫描运动。
2.如权利要求1所述的倾斜式三维扫描显微成像系统,其特征在于:
所述三维电动平移台(6)包括三个步进电机与丝杆以及导轨。
3.如权利要求2所述的倾斜式三维扫描显微成像系统,其特征在于:
所述三维电动平移台(6)还带有光栅反馈定位装置。
4.如权利要求1所述的倾斜式三维扫描显微成像系统,其特征在于:
还包括照明器(7);所述面阵相机(1)、筒镜(2)、显微物镜(3)以及所述照明器(7)构成同轴的透射式显微成像光路。
5.如权利要求1所述的倾斜式三维扫描显微成像系统,其特征在于:
还包括照明器(7);所述面阵相机(1)、筒镜(2)、显微物镜(3)以及所述照明器(7)构成反射式显微荧光成像光路。
6.一种如权利要求1-5任一项所述的倾斜式三维扫描显微成像系统的成像方法,其特征在于:
面阵相机所获得的图像的长度为L,样品扫描成像的层数为n,触发间隔距离为l,显微物镜的成像景深为h;样品平面即运动平面内的X轴与显微成像系统的焦平面构成夹角θ,运动平面内的Y轴与显微成像系统的焦平面依然保持平行;
参数的关系为:
L=l×n;
tanθ=h/l;
成像方法包括如下步骤:
步骤一、三维电动平移台(6)在计算机(9)和三维电动平移台控制器(8)的控制下,沿平行于台面的X轴方向移动样品区域相同长度的距离L,同时每隔距离l给出一个同步触发脉冲到面阵相机(1)上,图像处理器(10)监测到面阵相机(1)产生数字图像后,开始将数据读入到图像处理器(10)的缓存,获得第一个条带的扫描图像;
步骤二、三维电动平移台(6)移动Y轴,并沿X轴负方向运动距离L,同时每隔距离l给出一个同步触发脉冲到面阵相机(1)上,图像处理器(10)监测到面阵相机(1)产生数字图像后,开始将数据读入到图像处理器(10)的缓存,获得第二个条带的扫描图像;
步骤三、重复步骤二,依次获得多个条带的扫描图像,直至扫描成像区域完全覆盖了样品区域;
步骤四、按如下方式进行图像重建:
对每一个条带的扫描图像,图像处理器(10)先将所获取的相同Y轴坐标的图像进行平均分割,其分割的份数为样品扫描成像的层数n;根据X轴的坐标不同,单张图像分别被分割成编号为1至n共计n张图;图像处理器(10)将相同编号的图像拼接为一张条带图像,该条带图像即为扫描成像的单层图像;根据编号的不同,图像处理器一共拼接出n张不同的图像,分别为不同Z向深度的图像,每个条带的图像数据即重建为三维图像。
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