[发明专利]一种齐拉西酮人工抗原及其制备方法在审
申请号: | 201911043544.5 | 申请日: | 2019-10-30 |
公开(公告)号: | CN110922400A | 公开(公告)日: | 2020-03-27 |
发明(设计)人: | 王百龙;苏祥煌 | 申请(专利权)人: | 杭州博拓生物科技股份有限公司 |
主分类号: | C07D417/12 | 分类号: | C07D417/12;C07K14/765;C07K1/107;C07K16/44 |
代理公司: | 杭州天昊专利代理事务所(特殊普通合伙) 33283 | 代理人: | 向庆宁 |
地址: | 310000 浙江省*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 齐拉西酮 人工 抗原 及其 制备 方法 | ||
1.一种齐拉西酮半抗原,其特征在于,其具有如式(Ⅰ)所示的结构:
2.一种齐拉西酮人工抗原,其特征在于,其具有如式(Ⅱ)所示的结构:其中,p为载体蛋白,n表示一个载体蛋白上偶联的齐拉西酮半抗原的个数;
3.根据权利要求2所述的一种齐拉西酮人工抗原,其特征在于,所述载体蛋白选自牛血清白蛋白、牛γ球蛋白、牛甲状腺球蛋白、钥孔血蓝蛋白和鸡卵清白蛋白中的任意一种。
4.一种制备齐拉西酮半抗原的方法,其特征在于,该方法用于制备权利要求1所述的半抗原,包括如下步骤:
将齐拉西酮加入反应容器中,然后再加入吡啶、戊二酸酐,室温下搅拌反应2-24小时;反应结束后,蒸干溶剂,用薄层色谱法纯化,得到齐拉西酮半抗原;其中,齐拉西酮:戊二酸酐=1:1-1:4,此比例为物质的量之比。
5.一种制备齐拉西酮人工抗原的方法,其特征在于,该方法用于制备权利要求2-3任一项所述的齐拉西酮人工抗原,包括如下步骤:
(1)齐拉西酮半抗原的制备:
将齐拉西酮加入反应容器中,然后再加入吡啶、戊二酸酐,室温下搅拌反应2-24小时;反应结束后,蒸干溶剂,用薄层色谱法纯化,得到齐拉西酮半抗原;其中,齐拉西酮:戊二酸酐=1:1-1:4,此比例为物质的量之比;
(2)齐拉西酮人工抗原的制备:
a.称取齐拉西酮半抗原于另一反应容器中,加入N,N-二甲基甲酰胺,再加入N-羟基琥珀酰亚胺和N,N-二环己基碳二亚胺,室温搅拌反应过夜,反应结束后离心,取上清液记为A液;其中,齐拉西酮半抗原:N-羟基琥珀酰亚胺:N,N-二环己基碳二亚胺=1:1:1~1:7:7,此比例为物质的量之比;
b.制备pH为7.2~7.4的PBS缓冲液;
c.称取载体蛋白溶于步骤b中所述的PBS缓冲液中,得到的溶液记为B液;B液中,载体蛋白浓度为2-20mg/ml;
d.搅拌下,将A液滴加到B液,得到的混合液在4℃条件下静置过夜,得到齐拉西酮人工抗原混合液;A液:B液=(1~5000):1000,此比例为体积比;
e.将齐拉西酮人工抗原混合液移入透析袋中,用步骤b中的PBS缓冲液透析,透析结束后,离心取上清液即得到齐拉西酮人工抗原。
6.一种抗体,其特征在于,该抗体是采用权利要求2-3中任一项所述的齐拉西酮人工抗原免疫动物而获得。
7.根据权利要求6所述的一种抗体,其特征在于,所述抗体为单克隆抗体或者多克隆抗体。
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