[发明专利]一种铁皮石斛精制多糖提取物及其应用

说明书

本发明公开一种铁皮石斛精制多糖提取物及其应用，所述多糖的制备为：往铁皮石斛粉末中加入石油醚，回流提取，过滤，弃去滤液，得滤渣A；往滤渣A加入80%乙醇溶液，回流提取，过滤，弃去滤液，再往滤渣中加入水，回流提取，过滤，收集滤液，合并滤液，减压浓缩，得浓缩液；往浓缩液中加入sevage试剂进行脱蛋白，得脱蛋白的粗多糖浓缩液；在粗多糖浓缩液中加无水乙醇，静置，离心，收集沉淀；以及将沉淀溶解于蒸馏水中，真空冷冻干燥，得粗多糖；依次采用阴离子交换树脂和葡聚糖凝胶树脂对粗多糖进行分离纯化，真空冷冻干燥，即可得到铁皮石斛精制多糖。本发明所得的多糖提取物在制备治疗结肠癌药物中的应用。

技术领域

本发明涉及铁皮石斛技术领域，具体是一种铁皮石斛精制多糖提取物及其应用。

背景技术

铁皮石斛为兰科植物(Dendrobium officinale kimura et Migo)的干燥茎，是我国传统名贵珍稀中药材和药食两用的养生佳品，其具有治疗癌症、降血糖、增强免疫力、抗氧化、降血脂等多种功效，且毒副作用小。

其中铁皮石斛多糖具有提高免疫力、抗肿瘤作用；可改善造血、凝血功能，对降低血糖也有一定功效；对治疗中枢神经系统、肝脏、肾脏、胃肠道病变具有功效；对烫伤、病毒、细菌感染也有显著疗效。铁皮石斛多糖目前较为广泛地作为保健品或保健食品的添加成分，具有较高的经济价值。

虽然目前有研究对铁皮石斛多糖抑制肿瘤细胞的效果进行了报道，如刘亚娟的论文《铁皮石斛多糖抗癌及免疫活性研究》中报道，400μg/mL的铁皮石斛多糖对癌细胞HepG2、A549、F9、NCCIT作用48h后，抑制率分别达到37.28％，32.28％， 32.57％，28.70％。但铁皮石斛多糖在结肠癌方面的药用尚处于一片空白，尚无相关产品，也很少有相关的文献和专利的报道。而本发明研究结果显示，多糖作为铁皮石斛的主要成分，具有很好的抑制结肠癌的效果，其400μg/mL的抑癌率在48h达到了49.59％，远远高于铁皮石斛作用其他肿瘤细胞上的效果，甚至胜于化疗一线药物5-Fu的43.15％，且毒副作用小的多。因此，具有开发成新型抗结肠癌药物的前景。

以上背景技术内容的公开仅用于辅助理解本发明的发明构思及技术方案，其并不必然属于本专利申请的现有技术，在没有明确的证据表明上述内容在本专利申请的申请日已经公开的情况下，上述背景技术不应当用于评价本申请的新颖性和创造性。

发明内容

本发明目的在于提供一种铁皮石斛精制多糖提取物及其应用。本发明方法提取的石斛多糖具有纯度高、提取率高等优点，通过研究发现其提取物具有显著的抑制结肠癌活性，对于结肠癌新型抗肿瘤药物开发具有重要的意义。

为了实现以上目的，本发明采用的技术方案如下：

第一目的，本发明提供一种铁皮石斛精制多糖提取物的制备方法，包括如下步骤：

(1)按照料液比1:18～1:25g/mL往铁皮石斛粉末中加入石油醚，回流提取 1-2h，过滤，弃去滤液，得滤渣A；

(2)往滤渣A按照料液比1:18～1:20g/mL加入80％乙醇溶液，回流提取1-2h，过滤，弃去滤液，再往滤渣中按照料液比1:25～1:35g/mL加入水，回流提取1-2h，过滤，收集滤液，再往滤渣中加水重复提取2～3次，合并滤液，减压浓缩，得浓缩液；

(3)往浓缩液中加入sevage试剂进行脱蛋白，摇匀，静置，弃去下层氯仿层与中间白色蛋白层，收集上层多糖溶液，重复多次至无新的白色蛋白层产生，合并上层多糖溶液，减压浓缩，得脱蛋白的粗多糖浓缩液；

(4)在粗多糖浓缩液中加入3-6倍体积的无水乙醇，4℃下静置，离心，收集沉淀；以及将沉淀溶解于蒸馏水中，真空冷冻干燥，得粗多糖；

(5)依次采用阴离子交换树脂和葡聚糖凝胶树脂对粗多糖进行分离纯化，真空冷冻干燥，即可得到铁皮石斛精制多糖。