[发明专利]一种还原型抗原修复液

说明书

本发明提供一种还原型抗原修复液，其特征在于，所述还原型抗原修复液中包括浓度为0.01mol/L、PH值为7的柠檬酸缓冲液179mL，还包括1mL的0.5%曲拉通X‑100,20mL的10%β‑巯基乙醇。本发明的还原型抗原修复液是一种新型的抗原修复液，在组织染色上有更高的灵敏度和更低的背景值。

技术领域

本发明属于免疫组织化学领域，具体涉及一种还原型抗原修复液。

背景技术

免疫组织化学技术因其特异性、灵敏性、简洁性，还能够将形态和功能结合，定性、定位和定量相结合等优点，成功推动了该技术在半个多世纪以来广泛应用于病理诊断，作为一种重要的病理辅助诊断方法，在临床的应用中日益受到重视，尤其是在肿瘤诊断中不可缺少。

其原理是用已知抗体去检测未知抗原，常规的石蜡切片的组织要经过福尔马林固定和石蜡包埋，虽然上述过程能良好的保存标本在光镜下的形态，但是会不同程度地破坏组织的抗原，抗原在组织固定过程中因蛋白质的氨基与醛基交联成羧基，使部分蛋白抗原决定族被封闭，降低了组织的抗原与抗体的免疫反应率，因此，在免疫组化染色前，必须进行抗原修复。

目前主要的修复方法有热修复、蛋白酶修复、双重修复，由于蛋白酶的浓度和种类选择对抗原修复比较考究，不便于广泛的实施，所以目前主流的的抗原修复方法还是热修复的方法。柠檬酸盐、EDTA或Tris等缓冲液（抗原修复液）在热的条件下可以使被福尔马林屏蔽的抗原重新暴露出来，同时又不会对抗原表位造成破坏，从而提高抗原的检出率，降低背景染色，提高诊断的准确率。

发明内容

有鉴于以上所述，本发明提供一种还原型抗原修复液，这是一种不仅仅利用高温高压下的热力学对抗原进行修复，同时还利用了还原剂β-巯基乙醇对抗原进行修复，利用高渗透表面活性剂对抗原内部进行修复，不会使还原剂或者水质中的金属离子等残留在抗原内部，进一步避免了其他物质对后续染色的可能影响，与现有技术中的citrate、 EDTA等常用抗原修复液相比，本发明的还原型抗原修复液是一种新型的抗原修复液，在组织染色上有更高的灵敏度和更低的背景值。具体技术方案如下：

一种还原型抗原修复液，其特征在于，所述还原型抗原修复液成分中包括0.01mol/L柠檬酸缓冲液、曲拉通X-100和β-巯基乙醇，曲拉通X-100的浓度取0.5%，β-巯基乙醇的浓度取10%，其中柠檬酸缓冲液为179mL，曲拉通X-100为1mL，β-巯基乙醇为20mL。

本发明附加的方面和优点将在下面的描述中部分给出，部分将从下面的描述中变得明显，或通过本发明的实践了解到。

具体实施方式

下面详细描述本发明的实施例，下面描述的实施例是示例性的，仅用于解释本发明。

本发明一种还原型抗原修复液的最优实施例，其中包括浓度为0.01mol/L、PH值为7的柠檬酸缓冲液179mL，还包括1mL的0.5%曲拉通X-100,20mL的10%β-巯基乙醇。

在其他实施例中0.5%曲拉通X-100也可替换为同类高渗透表面活性剂，10%β-巯基乙醇也可替换为其他同类还原剂。

作为本发明拓展，以下对免疫组化组织切片染色方法作展开叙述，具体包括以下步骤：

步骤一，脱蜡和水化：将石蜡切片的组织依次进行以下处理，

1、二甲苯浸泡2次，每次15min；

2、无水乙醇浸泡2次，每次30s；

3、90%乙醇浸泡2次，每次30s；

4、70%乙醇浸泡2次，每次30s。；

5、蒸馏水冲洗1次，3 min；

6、浓度为0.01 mol/L，pH值为7的 PBS缓冲液冲洗2次，3min。