[发明专利]产生物表面活性剂的青霉菌及其应用

权利要求书

1.一种青霉菌，其保藏编号为CGMCC NO.10455。

2.一种青霉菌制剂，其包括保藏编号为CGMCC NO.10455的青霉菌。

3.根据权利要求1所述的青霉菌或权利要求2所述的青霉菌制剂，其特征在于，所述青霉菌具有SEQ ID NO：1的核苷酸序列。

4.根据权利要求1所述的青霉菌或权利要求2所述的青霉菌制剂，其特征在于，所述青霉菌的生物学特征为：营养体为无色或淡色的菌丝体，在气生菌丝上有长而直立的分生孢子梗，分生孢子梗上有瓶梗，在瓶梗上着生分生孢子链，分生孢子为球形至卵形，菌落不透明、绒毛状，呈绿色，边缘不整齐。

5.一种制备生物表面活性剂的方法，其包括：

步骤A：在发酵培养液中培养权利要求1所述的青霉菌；

步骤B：将步骤A之后的发酵培养液离心，去除菌体，得到上清液；

步骤C：将所述上清液中与氯仿/甲醇溶液混合，得到混合液；

步骤D：萃取所述混合液，取下层萃取液减压蒸干，得生物表面活性剂粗品；

可选地，所述方法还包括

步骤E：将所述生物表面活性剂粗品洗涤，干燥，得到所述生物表面活性剂。

6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述离心的条件为：5000-1000rpm，4℃，离心15-25min；和/或

所述氯仿/甲醇溶液的体积与所述上清液的体积比为0.25-1:1；和/或

所述氯仿/甲醇溶液中氯仿与甲醇溶液的体积比为2:1；和/或

所述萃取的次数为1-3次；和/或

所述洗涤为氯仿洗涤；和/或

所述干燥的温度为40-80℃。

7.根据权利要求5或6所述的方法，其特征在于，所述发酵培养液包括：Na₂HPO₄ 1.2-1.8g/L、KH₂PO₄ 3.2-3.6 g/L、(NH₄)₂SO₄ 2.8-3.2 g/L、MgSO₄ 0.6-0.9 g/L、酵母膏 0.005-0.015 g/L，EDTA 0.8-1.2 g/L，葡萄糖 4-6 g/L，液体石蜡 8-12 g/L，pH=6.8-7.2；或所述发酵培养液包括：Na₂HPO₄ 1.2-1.8 g/L、KH₂PO₄ 3.2-3.6 g/L、(NH₄)₂SO₄ 0.06-0.1 g/L、MgSO₄ 0.6-0.9 g/L、酵母膏 0.005-0.015 g/L，EDTA 0.8-1.2 g/L，液体石蜡 18-22 g/L，尿素 3.5-4.5 g/L，pH=6.8-7.2；

和/或，所述培养的条件为：150-250 rpm，25-35℃恒温培养5-10d。

8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，所述培养的条件为：180-200 rpm，27-32℃恒温培养6-8d。

9.根据权利要求5或6所述的方法，其特征在于，所述方法还包括在步骤A之前，挑取所述青霉菌单菌落在牛肉膏蛋白胨液体培养基中活化至对数生长期，将所述青霉菌的菌悬液接种至发酵培养基中。

10.根据权利要求9所述的方法，其特征在于，所述青霉菌的菌悬液按照5%的体积比接种至发酵培养基中。

11.根据权利要求9所述的方法，其特征在于，所述牛肉膏蛋白胨培养基包括：牛肉膏2-4 g/L，蛋白胨8-12 g/L，NaCl 4-6 g/L，固体培养基加1.2-1.7%琼脂粉，pH=7.0-7.2。

12.一种根据权利要求1所述的青霉菌或权利要求2所述的青霉菌制剂在降解石油烷烃中的应用。