[发明专利]一种筛选式获得高含量大麻二酚工业大麻植株的方法在审
申请号: | 201911048495.4 | 申请日: | 2019-10-31 |
公开(公告)号: | CN110736730A | 公开(公告)日: | 2020-01-31 |
发明(设计)人: | 司民真;罗煜;徐成东;李国树 | 申请(专利权)人: | 楚雄师范学院;楚雄绿波健康产业有限公司 |
主分类号: | G01N21/65 | 分类号: | G01N21/65 |
代理公司: | 53113 昆明合众智信知识产权事务所 | 代理人: | 张玺 |
地址: | 675000 云南省*** | 国省代码: | 云南;53 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 工业大麻 大麻二酚 植株 叶柄 拉曼光谱 筛选 拉曼光谱技术 植物幼苗期 标准确定 育种技术 组织培养 特征谱 新途径 标样 雌株 性状 应用 培育 分析 开发 | ||
1.一种筛选式获得高含量大麻二酚工业大麻植株的方法,其特征在于,包括下列步骤:
1)标准确定,取大麻二酚标样,滴在石英载玻片上,将其放置在显微拉曼光谱仪的载物台上,对大麻二酚进行显微拉曼光谱检测,获得大麻二酚标样的拉曼光谱,通过分析研究,确定出大麻二酚拉曼光谱的特征谱;
2)工业大麻处理,在工业大麻育苗期,当育苗中工业大麻达到5~10cm时,取各工业大麻雌株的一段叶柄,对取出的叶柄分别进行处理,处理后放置在显微拉曼光谱仪的载物台,对其进行显微拉曼光谱检测,获得各工业大麻雌株精油的拉曼光谱;
3)分析,将每株叶柄获取的工业大麻雌株精油的拉曼光谱取至少10条光谱线,求平均拉曼光谱,将每株叶柄获取的平均拉曼光谱分别与步骤1)中的大麻二酚拉曼光谱的特征谱进行对比,确定出每株叶柄的平均拉曼光谱的大麻二酚的特征谱,比较各株叶柄的平均拉曼光谱的大麻二酚的特征谱,通过比尔定律筛选出大麻二酚含量最高的叶柄;
4)培养,步骤3)中筛选出的大麻二酚含量高的叶柄的工业大麻植株作为母本进组织培养。
2.如权利要求1所述的一种筛选式获得高含量大麻二酚工业大麻植株的方法,其特征在于:所述步骤3)中将各叶柄获取的平均拉曼光谱与步骤1)中的大麻二酚标样的拉曼光谱的特征谱相比较,通过各叶柄的平均拉曼光谱与步骤1)中的大麻二酚标样的拉曼光谱的特征谱之间峰位比较,确定出各叶柄获取的平均拉曼光谱的大麻二酚的特征谱。
3.如权利要求1所述的一种筛选式获得高含量大麻二酚工业大麻植株的方法,其特征在于:比较所述步骤3)中各株叶柄的平均拉曼光谱的大麻二酚的特征谱的峰高,通过比尔定律筛选出大麻二酚含量最高的叶柄。
4.如权利要求1所述的一种筛选式获得高含量大麻二酚工业大麻植株的方法,其特征在于:所述步骤3)中将叶柄获取的工业大麻雌株精油的拉曼光谱取10~20条光谱线。
5.如权利要求1所述的一种筛选式获得高含量大麻二酚工业大麻植株的方法,其特征在于:所述步骤2)中一段叶柄的长度为0.5~1.5cm。
6.如权利要求1所述的一种筛选式获得高含量大麻二酚工业大麻植株的方法,其特征在于:所述步骤1)的显微拉曼光谱检测中使用的显微拉曼光谱仪中激光功率为2mw,激光波长为785nm;所述步骤2)的显微拉曼光谱仪中激光功率10mw~15mw,激光波长为785nm。
7.如权利要求1所述的一种筛选式获得高含量大麻二酚工业大麻植株的方法,其特征在于,所述步骤2)中对取出的叶柄分别进行处理的方法:用切片机对叶柄进行切片,将切片放置于装有去离子水的培养皿中,用毛笔挑选出透明完整的切片,置于石英载玻片上,切片完全浸入去离子水中。
8.如权利要求1所述的一种筛选式获得高含量大麻二酚工业大麻植株的方法,其特征在于,所述步骤2)中处理后放置在显微拉曼光谱仪的载物台的方法:将具有切片的石英载玻片放置在显微拉曼光谱光谱仪的载物台上,寻找切片上的储油器官,对储油器官中的精油进行拉曼光谱测量,获得各工业大麻雌株储油器官中精油的拉曼光谱,测量过程中,激光功率保持不变。
9.如权利要求1所述的一种筛选式获得高含量大麻二酚工业大麻植株的方法,其特征在于,取其平均拉曼光谱进行分析的方法:利用拉曼光谱仪自带软件,求平均拉曼光谱。
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