[发明专利]TRIML1作为肝癌的分子标记物的应用

说明书

本发明公开了TRIML1作为肝癌的分子标记物的应用。本发明还公开了用于肝癌检测的试剂盒，所述试剂盒包括特异性扩增TRIML1的引物序列。利用本发明的试剂盒进行肝癌的辅助诊断，对后续临床治疗具有指导意义。另外，还可将TRIML1抑制剂用来制备预防或治疗肝癌的药物组合物以用于肝癌的基因治疗、药物治疗等临床应用。

技术领域

本发明涉及肿瘤分子生物学技术领域，具体涉及TRIML1作为肝癌的分子标记物的应用。

背景技术

肝癌(Hepatocellular carcinoma，HCC)是最常见的恶性肿瘤之一，其预后差、易复发、致死率高和发病率高严重威胁人类的生活与健康，每年大约都会发现有超过50万名成人死于肝癌。肝癌发生的机制多种多样，具体的分子机制尚不完全清楚，其中炎症是肝癌发生的关键因素。此外，有研究证明，自分泌的IL-6会促进恶性肿瘤细胞生长。

现代医学主要研究采用手术肿瘤切除、放化疗、血管肿瘤介入综合治疗等手术方法，但治疗效果并不理想，年平均生存率仅8％～10％。尽管HCC的诊断和治疗有一定进展，但由于耐药和易于复发，HCC在很大程度上仍然无法治愈。因此研究人类肝癌早期发生及其发展的主要分子机制，对于不断寻求新的肝癌治疗疗法方式等也有着深远的现实意义。

TRIM(tripartite motif containing protein,三重基序蛋白)是一类结构保守、进化快速的E3泛素蛋白连接酶，参与诸多重要的生命过程。有文献报道，TRIM家族在许多类型的癌症中发挥重要作用，其中TRIM11、TRIM31、TRIM52和TRIM59等可以促进肝癌细胞的发生发展；TRIM16、TRIM26和TRIM50等可以抑制肝癌的发生发展。

TRIML1(tripartite motif family-like 1，三重基序家族样1)编码一种与TRIM家族高度相似的蛋白，区别在于TRIML1缺少B-box结构域。TRIML1最初发现于小鼠胚胎中，在小鼠胚胎发育的两个细胞胚胎到囊胚阶段均有表达。目前已知USP5是肝癌的促癌基因，可以促进肝癌的发生发展，而TRIML1可与USP5相互作用。

我们做过Huh7肝癌细胞的基因芯片，发现Huh7细胞中TRIML1有表达。因此，探究TRIML1在肝癌细胞中的作用应该也可以对肝癌的诊断和治疗等有所助益。

发明内容

为解决上述问题，本发明一个目的是提供肝癌的分子标记物TRIML1在制备肝癌检测或治疗产品中的应用，其中所述分子标记物为TRIML1基因或蛋白，其具有NCBI数据库的基因ID:339976所示人TRIML1的NM_178556.5或NP_848651.2所示序列。本发明人通过实验发现，所述分子标记物TRIML1能够明显促进肝癌细胞在体内和体外的恶性增长。

如本发明所用，术语TRIML1(三重基序家族样1，类E3泛素蛋白连接酶)是指人TRIML1基因或蛋白、或其同源物、或具有其生物活性的变体形式。

在本发明上述应用的一些实施方案中，所述产品为用于肝癌检测的芯片或试剂盒。

在本发明上述应用的一些实施方案中，所述检测为根据所检测对象的生物样本中的TRIML1表达水平来判断对象中肝癌的疾病状况，优选所述生物学样本为肝癌组织或肝癌细胞。

本发明另一个方面提供了用于肝癌检测的试剂盒，其包含特异性扩增人TRIML1基因的引物对，其中正向引物为如SEQ ID NO.1(AAGCTCAGGCTGTACTAACCC)所示的序列，反向引物为如SEQ ID NO.2(AGGACTCAATCTGTGCGATCAT)所示的序列。进一步地，所述试剂盒还包括RNA提取试剂、反转录试剂，以及PCR反应常用试剂如逆转录酶、缓冲液、dNTP、MgCl₂、DEPC水和Taq酶等，还可以含有标准品和/或对照品。