[发明专利]一种含具有降低血脂功效多糖的酸奶制备方法

说明书

本发明目的是生产一种含具有降血脂功能细菌纤维素的酸奶,属于食品加工技术领域。本发明通过组织捣碎匀浆机得到Gluconacetobacter intermedius的细菌纤维素混悬液后灭菌杀灭Gluconacetobacter intermedius，再通过图1的步骤，即可获得本发明的酸奶。此产品特点在于富含活性多糖，这些多糖能够调节人体的血脂。实验过程中发现在含有无活性的Gluconacetobacter intermedius但富含有其代谢产物细菌纤维素的酸奶中，其降血脂的能力是最强的。

技术领域

本发明涉及一种具有降血脂作用多糖与乳酸菌共同发酵制备酸奶的方法，属于食品加工技术领域。

背景技术

酸奶作为一种口味极佳，且能够改善肠道环境和促进消化吸收的饮品，它有着极大的市场，因此在这基础上，各公司为了增强酸奶的市场竞争力，筛选出一些能够对人体有益的菌，通过该菌发酵产生一系列的多糖。但是目前有报道指出，一位长期服用格列齐特的糖尿病患者，长期食用含益生菌的酸奶制品(干酪乳杆菌干酪亚种CNCM I-1518株)，最终发现她的血液中含有与酸奶中的菌株相同的菌落，证实酸奶饮品并不适用于某些疾病的人群。上述病例的原因是该酸奶中除了用于酸奶发酵的发酵剂(嗜热链球菌和保加利亚乳杆菌)外还含有一种活性的干酪乳杆菌，而加入干酪乳杆菌(干酪亚种CNCM I-1518株)的目的在于它能够产生出一种具有抑制高血脂现象的多糖。

发明内容

为了解决这一问题，本发明找到一种能够高效产细菌纤维素的中间葡糖醋杆菌，在保留其发酵后的产物活性多糖后，对其灭菌，再将这些活性多糖与发酵剂共同发酵制备酸奶。

中间葡糖醋杆菌保藏于北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所的中国普通微生物菌种保藏管理中心，保藏号为CGMCC NO.8318，保藏日期为2013年10月10日，分类命名为Gluconacetobacter intermedius。

本发明目的是生产一种含具有降血脂功能细菌纤维素的酸奶，此产品特点在于富含活性多糖，这些多糖能够调节人体的血脂。目前发现CGMCC No.8318能够高效产细菌纤维素，而细菌纤维素作为一种多糖，是膳食纤维的一种，它们可以帮助降低慢性疾病的风险，如糖尿病、肥胖、心血管疾病和憩室炎。

本发明提供了一种将CGMCC No.8318产的细菌纤维素与发酵剂共同发酵的方法，包括以下步骤：

(1)筛选CGMCC No.8318

取10g醋醅装入混有玻璃珠和90mL富集培养基(酵母粉5g/L，蛋白胨3g/L，D-甘露醇25g/L，121℃灭菌20min)的500mL三角瓶中，30℃、200r/min过夜,菌悬液用无菌生理盐水10倍梯度稀释(10-1，10-2，10-3，10-4，10-5)。取200μL合适梯度稀释液涂布在分离培养基上(D-葡萄糖20g/L，蛋白胨8g/L，酵母粉5g/L，轻质碳酸钙7g/L，琼脂粉12g/L；pH6.8，121℃灭菌20min,冷却到50℃后加乙醇5mL/L)30℃培养3～5d。挑取具有透明圈的单菌落划线培养,得到纯菌。挑取单菌落在HS培养基(葡萄糖20g/L，蛋白胨5g/L，酵母粉5g/L，柠檬酸1.15g/L，磷酸氢二钠4g/L；pH 6.0、121℃灭菌20min,冷却后加无水乙醇20m L/L)中30℃、180r/min培养2d,菌株用终体积分数20％的甘油于-80℃保藏。

(2)CGMCC No.8318的发酵

将CGMCC No.8318接入种子培养液中，经两次转接至菌体密度≥5×108CFU/mL时作为种子液；将种子液按50～150mL接种量接入生产发酵培养液中后，置于200mm×250mm的浅层无菌托盘中至该液厚度为1.5～5cm，表面覆盖无菌纱布，培养室保持通风，发酵的条件为保持温度37℃，以甘油(4.3±0.11)g/L和葡萄糖(4.18±0.09)g/L为复合碳源，pH调节为6，发酵14d。