[发明专利]一种检测动物性水产干制品中酸性偶氮类着色剂的液质联用检测方法

权利要求书

1.一种动物性水产干制品中酸性偶氮类着色剂的液质联用检测方法，其特征在于，将所述方法包括：

S1：将动物性水产干制品样品均质、脱脂处理后，用碱性溶液进行提取，浓缩，得到待净化溶液；

S2：将S1得到的待净化溶液调节pH值至3.0～4.0后，利用聚酰胺固相萃取柱进行净化，用碱性溶液进行洗脱，定容，备用；

S3：将S2所得样品用液相色谱-串联四级杆质谱联用仪进行定量检测；

S3所述液相色谱条件为：色谱柱为Waters Acquity UPLC RHSS-C18，2.1mm×50mm，1.8μm；柱温40℃；流动相，甲醇(A)和10mM乙酸铵溶液(B)梯度洗脱，0min～2min，10％A；2min～5min，90％A；5min～7min，10％A；流速0.2mL/min；进样量1μL；

S3所述质谱条件为：电喷雾离子源(ESI)；雾化电压为5500V；离子源温度为550℃；气帘气压力为25psi；辅助加热气Gas1压力为50psi；辅助加热气Gas2压力为50psi；碰撞气压力为12psi；所述质谱扫描选择负离子质谱扫描方式；检测方式采用多反应监测模式；

所述酸性偶氮类着色剂为酸性大红GR、酸性橙Ⅱ、酸性红、苋菜红、胭脂红、诱惑红、柠檬黄、日落黄和新红。

2.根据权利要求1所述的动物性水产干制品中酸性偶氮类着色剂的液质联用检测方法，其特征在于，S1所述脱脂处理，具体为：采用石油醚对动物性水产干制品样品进行3次脱脂处理。

3.根据权利要求1所述的动物性水产干制品中酸性偶氮类着色剂的液质联用检测方法，其特征在于，S1所述提取，具体为：向脱脂处理所得样品中加入碱性溶液，超声提取5分钟，8000rpm离心5min，取上清液；重复上述步骤2次，合并上清液，得到提取液；

S1所述碱性溶液为体积比7：2：1的乙醇-氨水-水溶液；

S1所述浓缩，具体为：于60℃氮气吹走提取液中的乙醇和氨。

4.根据权利要求3所述的动物性水产干制品中酸性偶氮类着色剂的液质联用检测方法，其特征在于，将所述提取液浓缩至5mL以下。

5.根据权利要求1所述的动物性水产干制品中酸性偶氮类着色剂的液质联用检测方法，其特征在于，S2中采用200g/L柠檬酸溶液将S1得到的待净化溶液调节pH值至3.0～4.0。

6.根据权利要求1所述的动物性水产干制品中酸性偶氮类着色剂的液质联用检测方法，其特征在于，S2所述净化，具体为：先用水活化聚酰胺固相萃取柱，将调节pH值至3.0～4.0后的所述样品提取液全部转移到聚酰胺固相萃取柱上，分别用水和体积比为6:4的甲醇-甲酸溶液和70℃水淋洗聚酰胺固相萃取柱，以去除天然色素和其他杂质。

7.根据权利要求1所述的动物性水产干制品中酸性偶氮类着色剂的液质联用检测方法，其特征在于，S2所述洗脱采用体积比为2：8的甲醇-1vol％氨水溶液。

8.根据权利要求1所述的动物性水产干制品中酸性偶氮类着色剂的液质联用检测方法，其特征在于，S2所述定容，具体为：将洗脱液吹至近干后，用体积比为2：8的甲醇-1vol％氨水溶液定容至1mL，用聚四氟乙烯滤头过滤后备用。

9.根据权利要求1所述的动物性水产干制品中酸性偶氮类着色剂的液质联用检测方法，其特征在于，S3中所述定量方法为外标法定量，以各物质定量离子在质谱上的响应面积为纵坐标，以标准溶液的浓度为横坐标绘制标准曲线，得到线性方程及相关系数。

10.根据权利要求1至9任一项所述的动物性水产干制品中酸性偶氮类着色剂的液质联用检测方法，其特征在于，当使用API5500液相色谱-质谱联用仪时，9种酸性偶氮类着色剂的质谱参数如下表所示：

所述*为定量子离子。

11.权利要求1至10任一项所述的动物性水产干制品中酸性偶氮类着色剂的液质联用检测方法在动物性水产干制品中酸性偶氮类着色剂检测中的应用；

所述酸性偶氮类着色剂为酸性大红GR，酸性橙Ⅱ、酸性红、苋菜红、胭脂红、诱惑红、柠檬黄、日落黄和新红。