[发明专利]检测人乙醇代谢基因多态性的组合物、试剂盒及方法

权利要求书

1.一种组合物，所述组合物包括：

检测ALDH2基因的rs671位点的引物和探针：如SEQ ID NO:1所示的ALDH2基因上游引物、如SEQ ID NO:2所示的ALDH2基因下游引物和如SEQ ID NO:3和4所示的ALDH2基因的探针；

检测ADH1B基因的rs1229984位点的引物和探针：如SEQ ID NO:5所示的ADH1B基因上游引物、如SEQ ID NO:6所示的ADH1B基因下游引物和如SEQ ID NO:7和8所示的ADH1B基因的探针；

其中，4种探针的荧光报告基团互不相同；

其中，所述组合物还包括核酸释放试剂，所述核酸释放试剂包括0.01～0.5mmol/L的莎梵婷、100～200mmol/L的氯化钾、50～200mmol/L的氯化锂、质量/体积比为0.1％～1％的十二烷基硫酸三乙醇胺、体积/体积比为0.1％～1％的乙基苯基聚乙二醇、质量/体积比为0.01％～2％的十二烷基磺酸钠和体积/体积比为0.05％～1％的乙醇。

2.根据权利要求1所述的组合物，其中，如SEQ ID NO:3所示的ALDH2基因的探针的荧光报告基团为FAM；如SEQ ID NO:4所示的ALDH2基因的探针的荧光报告基团为CY5；如SEQ IDNO:7所示的ADH1B基因的探针的荧光报告基团为ROX；如SEQ ID NO:8所示的ADH1B基因的探针的荧光报告基团为HEX。

3.权利要求1或2所述的组合物在制备检测乙醇代谢能力的试剂盒中的用途。

4.一种用于检测乙醇代谢能力试剂盒，所述试剂盒包括权利要求1或2所述的组合物。

5.一种用于以非诊断目的检测乙醇代谢能力的方法，所述方法包括以下步骤：

1)使用如权利要求1所述的核酸释放剂释放待测样本的核酸；所述待测样本为全血或者口腔拭子；

2)使用如权利要求1或2所述的组合物或权利要求4中任一项所述的试剂盒对步骤1)获得的核酸进行荧光定量PCR；

3)获得并通过判断扩增曲线和CT值来分析结果；如果样本扩增曲线呈明显的S型，且满足Ct≤27，可以判为相应SNP类型阳性；如果样本扩增曲线平直，无Ct值显示，可以判为相应SNP类型的阴性。

6.根据权利要求5所述的方法，其中，所述荧光定量PCR的反应条件为：