[发明专利]一种丁香酚半抗原、人工抗原及其制备方法与应用

权利要求书

1.丁香酚抗原，为将式I所述化合物与载体蛋白偶联所得的抗原，其中所述载体蛋白是牛血清白蛋白、卵清蛋白、人血清白蛋白、血蓝蛋白、鼠血清蛋白、甲状腺蛋白或兔血清蛋白；其中所述丁香酚抗原的制备方法，为将式I所述化合物与载体蛋白通过酰胺键偶联，获得所述丁香酚抗原，包括如下步骤：

(1)将所述丁香酚半抗原(式I)溶解于二甲基甲酰胺(DMF)中，然后加入1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(EDC)和N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)，20-25℃磁力搅拌反应2-3h，得到溶液I；其中，所述丁香酚半抗原(式I)、所述二甲基甲酰胺(DMF)、所述1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(EDC)、所述N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)的配比为7.8mg：1.5ml：21.5mg：13mg；

(2)将所述载体蛋白置于0.1M碳酸氢钠缓冲液中，200rpm搅拌10min，充分溶解，得到溶液II；所述载体蛋白与所述0.1M碳酸氢钠缓冲液的配比为33.6-50mg：3.5ml；

(3)将所述溶液I和所述溶液II混合，具体为在0-4℃条件下，1000rpm搅拌下，将溶液I逐滴加入到所述溶液II中，500rpm搅拌反应24h，得到溶液III；

(4)用磷酸盐缓冲液(0.01M PBS，pH7.2)，于4℃对所述溶液III搅拌透析3天，得到所述丁香酚抗原；

2.权利要求1所述丁香酚抗原的应用，其特征在于定性或定量检测丁香酚；制备丁香酚抗体。

3.根据权利要求2所述的丁香酚抗原的应用，其特征在于制备酶联免疫试剂盒和胶体金检测卡。

4.根据权利要求2或3所述的丁香酚抗原的应用，其特征在于检测样本为水产及组织，所述检测上述样本中丁香酚的检测限为0.5μg/kg，灵敏度为0.51μg/kg。