[发明专利]一种家蚕丝素蛋白溶液的制备及鉴定方法

权利要求书

1.一种家蚕丝素蛋白溶液的制备方法，其特征在于，以家蚕蚕丝为原料，依次经脱胶、水解、去杂和灭菌步骤，即得所述的一种家蚕丝素蛋白溶液，其中，水解步骤的具体方法是：

(1)先将氯化钙、硫氰化钠、蒸馏水、1,2,4-丁三醇、聚乙二醇300、二乙烯三胺五乙酸以质量比1：0.5～0.6：6～8：2～3：4～5：0.8～1混合得到溶解液，备用；

(2)然后将脱胶步骤后所得脱胶蚕丝先后进行冻融处理和微波处理；

(3)最后将步骤(2)处理后的蚕丝加入4～6倍重量的溶解液中，70～80℃和0.5～0.6MPa条件下处理5～8小时即可。

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，脱胶处理的具体方法是：将蚕丝浸泡于4～6倍重量的质量浓度0.5～1％碳酸钠水溶液中，边搅拌边煮沸处理30～40分钟，重复3～4次，捞出后用去离子水洗涤2～3次即可。

3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，去杂的具体方法是：以5000～6000转/分钟离心处理8～10分钟。

4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，灭菌的具体方法是：121℃和0.1MPa条件下处理30～40分钟。

5.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤(1)中，所述溶解液的制备方法如下：先将氯化钙和硫氰化钠溶于1/3配方量的蒸馏水中，得到第一部分水溶液，然后将聚乙二醇300加入剩余配方量的蒸馏水中，加热至80～90℃，加入二乙烯三胺五乙酸，搅拌至溶解并冷却至室温(25℃)，得到第二部分水溶液，接着将第一部分水溶液与第二部分水溶液混合，超声波振荡20～30分钟，加入1,2,4-丁三醇，继续超声波振荡30～40分钟，即得。

6.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤(2)中，冻融处理的具体方法是：先在-10～-5℃条件下冷冻处理8～10小时，然后室温(25℃)融化解冻，接着-20～-15℃条件下冷冻处理4～5小时，最后室温(25℃)融化解冻。

7.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤(2)中，微波处理的具体方法是：先以300～450W微波辐照20～30s，然后以500～750W微波辐照5～10s，再以300～450W微波辐照10～15s。

8.利用权利要求1～7中任一项所述制备方法得到的一种家蚕丝素蛋白溶液。

9.权利要求8所述一种家蚕丝素蛋白溶液在制备丝素蛋白膜、凝胶、粉末、薄膜支架和薄膜纤维中的应用。

10.权利要求8所述一种家蚕丝素蛋白溶液的鉴定方法，其特征在于，先将丝素蛋白溶液加入5～8倍重量的5～7mol/L甘氨酸水溶液中，35～37℃孵育20～30分钟，离心收集上清液，然后柱层析分离所述上清液，并利用蛋白标记物进行鉴定；其中，柱层析分离所使用洗脱剂为甘氨酸-尿素水溶液，洗脱时间为20～30分钟，所述甘氨酸-尿素水溶液是将甘氨酸、尿素和蒸馏水以质量比1：2～3：8～10混合溶解得到。