[发明专利]一种用于培养脑肿瘤实体瘤原代细胞的培养基

权利要求书

1.一种用于培养脑肿瘤实体瘤原代细胞的培养基，其特征在于：所述培养基由抗菌抗真菌剂三抗、HEPES、GlutaMax、人重组蛋白bFGF、人重组蛋白HGF、人重组蛋白MSP、人重组蛋白VEGF、人重组蛋白BDNF、A83-01、N-乙酰-L-半胱氨酸、N-2 Supplement、SB431542、Y-27632、CHIR99021和Advanced DMEM/F12培养基组成；其中，所述抗菌抗真菌剂三抗中的青霉素的终浓度为100-200U/mL；所述抗菌抗真菌剂三抗中的链霉素的终浓度为100-200µg/mL；所述抗菌抗真菌剂三抗中的两性霉素 B的终浓度为250-250ng/mL；所述HEPES的终浓度为8-12mM；所述GlutaMax的终浓度为0.8-1.2%体积百分含量；所述人重组蛋白bFGF的终浓度为30 ng/mL；所述人重组蛋白HGF的终浓度为20 ng/mL；所述人重组蛋白MSP的终浓度为20 ng/mL；所述人重组蛋白VEGF的终浓度为40 ng/mL；所述人重组蛋白BDNF的终浓度为100ng/mL；所述A83-01的终浓度为1μM；所述N-乙酰-L-半胱氨酸的终浓度为1mM；所述N-2Supplement的终浓度为1%体积百分含量；所述SB431542的终浓度为2μM；所述Y-27632的终浓度为10μM；所述CHIR99021的终浓度为4μM；余量均为Advanced DMEM/F12培养基。

2.根据权利要求1所述的培养基，其特征在于：所述培养基中的各组分单独存在。

3.一种用于培养脑肿瘤实体瘤原代细胞的培养基，其特征在于：所述培养基由抗菌抗真菌剂三抗、HEPES、GlutaMax、人重组蛋白bFGF、人重组蛋白HGF、人重组蛋白MSP、人重组蛋白VEGF、人重组蛋白BDNF、A83-01、N-乙酰-L-半胱氨酸、N-2 Supplement、SB431542、Y-27632、CHIR99021和Advanced DMEM/F12培养基组成；其中，所述抗菌抗真菌剂三抗中的青霉素的终浓度为100-200U/mL；所述抗菌抗真菌剂三抗中的链霉素的终浓度为100-200µg/mL；所述抗菌抗真菌剂三抗中的两性霉素 B的终浓度为250-250ng/mL；所述HEPES的终浓度为8-12mM；所述GlutaMax的终浓度为0.8-1.2%体积百分含量；所述N-2 Supplement的终浓度为1%体积百分含量； 所述人重组蛋白bFGF、所述人重组蛋白HGF、所述人重组蛋白MSP、所述人重组蛋白VEGF、所述人重组蛋白BDNF、所述A83-01、所述N-乙酰-L-半胱氨酸、所述Y-27632、所述SB431542和所述CHIR99021以母液形式存在；余量均为Advanced DMEM/F12培养基；

所述母液为1000-100000倍母液；

1000×人重组蛋白bFGF储液由人重组蛋白bFGF、BSA和PBS组成，其中所述人重组蛋白bFGF的终浓度为20 μg/mL，所述BSA的终浓度为0.01g/mL，余量均为PBS；

1000×人重组蛋白HGF储液由人重组蛋白HGF、BSA和PBS组成，其中所述人重组蛋白HGF的终浓度为20 μg/mL，所述BSA的终浓度为0.01g/mL，余量均为PBS；

1000×人重组蛋白MSP储液由人重组蛋白MSP、BSA和PBS组成，其中所述人重组蛋白MSP的终浓度为20 μg/mL，所述BSA的终浓度为0.01g/mL，余量均为PBS；

1000×人重组蛋白VEGF储液由人重组蛋白VEGF、BSA和PBS组成，其中所述人重组蛋白VEGF的终浓度为20 μg/mL，所述BSA的终浓度为0.01g/mL，余量均为PBS；

1000×人重组蛋白BDNF储液由人重组蛋白BDNF、BSA和PBS组成，其中所述人重组蛋白BDNF的终浓度为100 μg/mL，所述BSA的终浓度为0.01g/mL，余量均为PBS；

100000×A83-01储液由A83-01和DMSO组成，其中所述A83-01的浓度为25mM，余量均为DMSO；

1000×N-乙酰-L-半胱氨酸储液由N-乙酰-L-半胱氨酸和水组成，其中所述N-乙酰-L-半胱氨酸的浓度为0.5M，余量均为水；

1000×Y-27632储液由Y-27632和水组成，其中Y-27632的终浓度为10 mM，余量均为水；

10000×SB431542储液由SB431542和水组成，其中SB431542的终浓度为10 mM，余量均为水；

10000×CHIR99021储液由CHIR99021和水组成，其中CHIR99021的终浓度为10 mM，余量均为水。