[发明专利]一种中药植物山木通的组培快繁方法

说明书

本发明公开了一种中药山木通的组培快繁方法，包括依次进行的如下步骤：获取山木通的外植体、不定芽诱导培养、不定芽增殖培养、生根培养、移栽；所述的不定芽诱导培养操作的培养基包括：WPM培养基、3～4mg/L ZT、3～4mg/L CTK、20～30g/L蔗糖、3.5～4.5g/L琼脂，pH为5.4～5.8。本发明的诱导率达到了88％以上，移栽成活率达到了90％以上，实现了山木通的组培快繁。

技术领域

本发明涉及农业生物技术中植物组织培养的方法，具体来说是一种中药植物山木通的组培快繁方法。

背景技术

毛茛科铁线莲属植物是一类具有观赏和药用价值的植物，攀援性强，花型多变，花色丰富，花期长，也是优良的垂直绿化材料。山木通(Clematis finetiana)为毛茛科铁线莲属多年生藤本植物，分布于云南、四川、贵州(700-1200米)、河南鸡公山、湖北、湖南(300-1200米)、广东(200-800米)、广西、福建(400-1000米)、江西(100-700米)、浙江(120-1200米)、江苏南部、安徽淮河以南(100-900米)。中药药效为祛风利湿，活血解毒。治风湿关节肿痛，肠胃炎，疟疾，乳痈，牙疳，目生星翳。花期4－5月，花色洁白，小而繁茂，栽培适应性佳，但其自然结实率和种子繁殖系数均偏低。同时，山木通野生群体中存在花色、花型自然变异的单株，是优良的观赏种质资源，唯有通过无性繁殖才能实现品种化。目前，对山木通的研究主要集中在化学成分及药用价值方面，有关繁殖技术研究的报道较少。

发明内容

本发明的目的是提供一种中药山木通的组培快繁方法，选择山木通带两个侧芽的茎段为外植体，经不定芽诱导培养、不定芽增殖培养、生根培养以及移栽等步骤，其诱导率达到了88％以上，移栽成活率达到了90％以上，实现了山木通的组培快繁，从而实现了本发明的目的。

本发明提供的技术方案为：一种中药山木通的组培快繁方法，包括依次进行的如下步骤：获取山木通的外植体、不定芽诱导培养、不定芽增殖培养、生根培养、移栽；所述的不定芽诱导培养操作的培养基包括：WPM培养基、3～4mg/L ZT(玉米素)、3～4mg/L CTK(细胞分裂素)、20～30g/L蔗糖、3.5～4.5g/L琼脂，pH为5.4～5.8。在上述的中药山木通的组培快繁方法中，所述的不定芽诱导培养操作的方法为：将采集得到的作为外植体的山木通消毒后剪切成2.5～3cm的带两个侧芽的茎段并接种到诱导培养基中，置于25℃,自然光培养40～50天即可诱导形成不定芽。

在上述的药山木通的组培快繁方法中，所述的不定芽增殖培养操作所用到的增殖培养基包括：WPM培养基、3～4mg/L IAA(吲哚乙酸)、40mg/L腺嘌呤、20～30g/L蔗糖、3.5～4.5g/L琼脂，pH为5.4～5.8。

在上述的中药山木通的组培快繁方法中，所述的不定芽增殖培养操作具体为：将不定芽诱导培养得到的不定芽切成长1.5～2.0cm的茎段并接种到增殖培养基中培养40～50天即可实现不定芽的增殖。

在上述的中药山木通的组培快繁方法中，所述的生根培养操作所用到的生根培养基包括：MS培养基、1～2mg/L ETH(乙烯)、20～30g/L蔗糖、3～4g/L琼脂、，pH为5.4～5.8。

在上述的中药山木通的组培快繁方法中，所述的生根培养操作的方法为：从不定芽增殖培养得到增殖后的不定芽的基部切取2.0～3.0cm不定芽并接种到生根培养基中培养40～50天即能实现试管苗的生根。

在上述的中药山木通的组培快繁方法中，所述的移栽操作的具体方法为：将经生根培养操作得到的根系生长良好的试管苗在温室大棚的自然光下炼苗10天，洗净根部的培养基移栽于河沙中栽培成苗即得山木通种苗。

在上述的山木通的组培快繁方法中，不定芽增殖培养操作、生根培养操中培养条件均为：培养温度为25～28℃，采用自然光进行培养，光照强度为100～1200lx。

有益效果：