[发明专利]一种用于脾虚湿盛证研究的动物模型构建方法及其应用

说明书

本发明涉及生物医药技术领域，具体公开了一种用于脾虚湿盛证研究的动物模型构建方法。该动物模型分成两步构建：一是选用雄性大鼠并饲以高脂饲料，相对湿度53±3%，维持昏暗安静环境，定时对大鼠舌背面色泽深浅进行记录、摄取舌象、比较分析和定量分级，定时测定生理生化指标，肠道菌群和色氨酸及其代谢物，定时记录大鼠毛色、尿液和大便、精神状况等体征，至4‑6周，完成郁、湿热证阶段大鼠构建；二是对上述郁、湿热证阶段大鼠继续饲以高脂饲料，同时将相对湿度提高到90±3%，继续检测和观察上述指标，至8‑10周止，完成脾虚和瘀证阶段大鼠模型构建。该大鼠模型构建具有造模方法简单、易于操作和推广、贴近临床等特点。

技术领域

本发明属于生物医药技术领域，具体涉及一种用于脾虚湿盛证研究的动物模型构建方法及其应用。

背景技术

由于“富营养时代”饮食类型主要为“肥甘厚味”，肥甘厚味的饮食物摄入过多，脾虚湿盛证人群也越来越多。脾虚湿盛不仅会造成纳差、腹泻、肛门灼痛、神疲乏力等症状，并且由于脾为后天之本，气血生化之源，位处中焦。所以脾虚湿盛也与很多肝、胃等脏腑疾病相关。由于脾的重要性，健脾祛湿药剂的研制也越发重要。而中医证候动物模型的建立与评价一直以来是中医药研究的重要课题，虽然越来越多的文献对脾虚模型的舌象做了相关实验研究,例如：陈小野、邹世洁、佟彤等.大鼠长期脾虚和热证造模的舌象观察[J].北京中医药大学学报, 1998,21(01):32-34；又如：陈小野、邹世洁、张智等.大鼠长期脾虚造模的实验研究[J].中国中医基础医学杂志,1995,01(01):37-4；还如：陈小野、邹世洁.大鼠虚证模型舌象的病理规律[J].贵阳中医学院学报,2001,23(03):54-57。但迄今为止，尚无有关脾虚动物模型证候表征的定量评价标准研究，也无合理运用中医四诊合参技术来造成符合人的脾虚湿盛证的成功率高、模型稳定性好的方法。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是：针对现有技术中尚无有关脾虚动物模型证候表征的定量评价标准和造模简单、符合人的脾虚湿盛发展过程模型的缺陷与不足，提供一种用于脾虚湿盛证研究的动物模型构建方法及其应用。本发明以喂养高脂饲料来构建脾虚大鼠模型，以期用湿热伤脾来导致郁、湿热、脾虚和瘀证。并观察从大鼠郁、湿热开始的舌色、二便、精神状态和腹部变化情况，按评分标准进行舌色的单因素方差分析，得出高脂饲料喂养大鼠导致脾虚和瘀证的舌色变化，二便、精神状态和腹部变化情况，及肠道特征菌Akkermansia (AKK)和色氨酸及其代谢物变化特征。并期待将该大鼠模型用于人类郁、湿热、脾虚和瘀证的研究及补脾祛湿药物的研制。

本发明采用如下技术方案，来实现发明目的。

首先，本发明公开了一种用于脾虚湿盛证研究的动物模型构建方法。该构建方法包括郁、湿热证阶段大鼠的构建，和脾虚、瘀证阶段大鼠模型的构建。

所述郁、湿热证阶段大鼠的构建步骤为：选用体重160±20g雄性大鼠，在屏障系统适应性喂养一周后，动物随机分为正常组和模型组，分别喂养普通饲料和高脂饲料，保持自由进食与自由饮水，相对湿度53±3%，维持昏暗安静环境，定时检测和观察多项指标，至4-6周，完成郁、湿热证阶段大鼠的构建。

所述脾虚、瘀证阶段大鼠模型的构建步骤为：对上述郁、湿热证阶段大鼠继续饲以高脂饲料，同时将相对湿度提高到90±3%，继续定时检测和观察多项指标，至8-10周止，完成脾虚、瘀证阶段大鼠模型的构建。

进一步地，所述的高脂饲料，以正常基础维持饲料为基础，添加黄油、猪油和胆固醇而得到。

更进一步地，所述的正常基础维持饲料，含脂量为10%；以质量份数计，采用配方为：氯化胆碱0.1-0.3份、玉米20-30份、小麦30-40份、蜜糖酵母2-3份、磷酸氢钙1.5-2.5份、石粉0.8-1.2份、生长预混料1份、食盐0.2-0.4份、油2-3份、豆粕15-25份、鱼粉4-6份、酪蛋白8-12份。