[发明专利]一种脾虚湿阻型单纯性肥胖动物模型的建立方法有效
申请号: | 201911069151.1 | 申请日: | 2019-11-05 |
公开(公告)号: | CN110558286B | 公开(公告)日: | 2020-03-10 |
发明(设计)人: | 张琦;陈浩;刘志勇;侯吉华;刘利艳;万强;王万春;艾志福;项凤梅;曾晶晶 | 申请(专利权)人: | 江西中医药大学 |
主分类号: | A01K67/02 | 分类号: | A01K67/02;A23K50/50;A23K20/158;A23K20/20;A23K20/163 |
代理公司: | 南昌青远专利代理事务所(普通合伙) 36123 | 代理人: | 刘爱芳 |
地址: | 330000 江西*** | 国省代码: | 江西;36 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 脾虚湿阻型 单纯性 肥胖 动物 模型 建立 方法 | ||
1.一种脾虚湿阻型单纯性肥胖动物模型的建立方法,其特征在于,包括如下步骤:
S1:购买40~100只健康清洁级、体重180~220g的雄性SD品系大鼠;
S2:适应性喂养;
S21:对购买回的健康大鼠,先使用普通饲料+高脂饲料混合喂养1周;每天定时测量前一天同时刻所加饲料的剩余量,由饲料的剩余量计算消耗量,用消耗量除以食用该饲料的大鼠总体重,计算摄食量/每克体重;
S22:再以大于等于摄食量/每克体重为基准,使用高脂饲料适应性喂养1周;
S3:脾虚湿阻肥胖模型建立:将挑出的大鼠在22~28℃、空气湿度40~50%的环境中,
A、在该喂养周期的前20~30天,按照如下方式喂养及锻炼:若以喂养起始的第一天为单日、第二天为双日、第三天为单日…至结束,以此类推,则:单日高脂饲料喂养,且以大于等于摄食量/每克体重作为施加饲料的标准;双日禁食高脂饲料,并按照30g每只每天喂食低脂蛋白饲料;在该20~30天内每日锻炼大鼠自由游泳达到耐力极限,然后持续用高脂饲料继续喂养至8-11周;或者
B、以大于等于摄食量/每克体重作为施加饲料的标准,以高脂饲料自始喂养8-11周;在喂养周期的第1-21天,用冰糖水按每日2次每次2ml/只灌胃,同时锻炼大鼠自由游泳达到耐力极限;
在上述两种喂养周期8~11周结束后,分别测定每只大鼠单个体重,挑选出体重≥500g的大鼠;
挑选出的体重≥500g的大鼠按照下述指标评分判断及选出造模成功的脾虚湿阻型单纯性肥胖动物模型,症状评分≥10分则造模成功;
造模筛选指标及症状评分:
a.行为:倦怠,无0分,有1分;扎堆,无0分,有1分;嗜卧无0分,有1分;动作缓慢,轻度缓慢1分,重度2分;
b.精神状态:正常0分,萎靡1分,常眯眼1分,反应迟钝2分;
c.毛发、耳尾及肛门部:毛发耳尾肛门均正常0分,毛发稀疏1分,枯黄无光泽2分,耳尾血色淡1分;
d.排便:正常0分,大便稀溏、便软不成形1分,泻下如水样2分;
e.造模五周后,正常0分,大鼠进食量少1分,体重增长缓慢或下降2分;
f.体温下降,数字式医用远红外热成像仪观察到动物远红外辐射的温度变化一般1分,明显2分;
g.舌体胖大质淡苔白滑,质正常淡红无苔0分,淡红有薄苔1分。
2.根据权利要求1所述的一种脾虚湿阻型单纯性肥胖动物模型的建立方法,其特征在于:在步骤S21中,先使用普通饲料+高脂饲料混合喂养1周期间,其中前三天是普通饲料和高脂饲料按3:1的质量比混合喂养,后四天是普通饲料和高脂饲料按2:1的质量比混合喂养。
3.根据权利要求1所述的一种脾虚湿阻型单纯性肥胖动物模型的建立方法,其特征在于:
每份普通饲料具体组成是:水分9.2%,粗蛋白19.98%,粗脂肪5.28%,粗灰分5.20%,粗纤维4.12%,无氮浸出物52.0%,钙1.24%,磷0.92%,钙:磷=1.35,赖氨酸1.34%,蛋氨酸+胱氨酸0.72%,能量352kcal;
每份高脂饲料具体的组成是普通饲料88.9%,胆固醇1%,黄油10%,猪胆盐0.1%;
每份低脂蛋白饲料具体组成是:水分9.2%,粗蛋白10%,粗脂肪5.28%,粗灰分5.20%,粗纤维4.12%,无氮浸出物52.0%,钙1.24%,磷0.92%,钙:磷=1.35,赖氨酸1.34%,蛋氨酸+胱氨酸0.72%,余量为脂肪,能量352kcal;上述百分比组成均为质量百分比。
4.根据权利要求1所述的一种脾虚湿阻型单纯性肥胖动物模型的建立方法,其特征在于:在步骤S21中,将5~10只大鼠为一组进行喂养,一共准备5~8组;以摄食情况最好的一组大鼠为基础计算摄食量/每克体重。
5.根据权利要求1所述的一种脾虚湿阻型单纯性肥胖动物模型的建立方法,其特征在于:在所述步骤S21中,摄食量/每克体重为1.0~1.5g饲料/g体重。
6.根据权利要求1所述的一种脾虚湿阻型单纯性肥胖动物模型的建立方法,其特征在于,在所述步骤S3的A、B中,锻炼大鼠自由游泳达到耐力极限是指:在水深20cm、水温20±2℃的水槽中,每日1次,至大鼠游泳即将下沉即为耐力极限。
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