[发明专利]靶向OFA/iLRP的核酸适配体

说明书

本发明提供一种靶向OFA/iLRP的核酸适配体，包含如SEQ ID No.1所示核苷酸序列。该分子为能够结合OFA/iLRP的DNA核酸适配体。该核酸适配体能够以较高的亲和力与OFA/iLRP抗原结合，同时与其他蛋白如白蛋白、卵清蛋白、胰蛋白酶等结合较弱。该核酸适配体能够特异性结合OFA/iLRP阳性肿瘤细胞。此外，该核酸适配体具有较强的抵抗核酸酶的能力，具有较好的体内应用潜能。该核酸适配体有望成为OFA/iLRP阳性肿瘤细胞靶向治疗的配体分子。

技术领域

本发明属于肿瘤的靶向治疗领域，涉及一种核酸适配体，具体涉及一种靶向OFA/iLRP的核酸适配体，通过将治疗肿瘤的药物靶向递送到肿瘤细胞，从而实现肿瘤的靶向杀伤。

背景技术

恶性肿瘤是一类可以浸润破坏器官结构和功能、发生转移，且以细胞分化不成熟和生长迅速为特征的疾病，是目前危害人类健康的最严重疾病之一。世界卫生组织在《全球癌症报告2015》中指出，全球癌症患者和死亡病例都在快速增加，2012年全球有1400万恶性肿瘤新发病例，其死亡人数占人类死亡总数的14.6％，且新发肿瘤超过50％来自中国。传统的肿瘤治疗方法主要包括外科手术治疗、放疗和化疗。但对于肿瘤发生转移的晚期患者，病人接受手术治疗的可能性降低，而化疗由于缺少肿瘤靶向性，在杀伤肿瘤细胞的同时也会对正常组织产生损伤，具有很强的毒副作用，从而限制了化疗的治疗剂量及频率，使得化疗难以清除机体内的全部肿瘤细胞，导致肿瘤复发或转移。因此，急需新的治疗方法来解决这一难题。靶向治疗，通过将抗肿瘤药物靶向递送到肿瘤细胞，使得药物更多地富集在肿瘤组织内，在杀伤肿瘤细胞的同时减少对机体正常组织细胞的损伤，从而有助于清除体内的肿瘤细胞，并大大降低毒副作用。靶向治疗成为一种新型抗肿瘤策略。

实现肿瘤靶向治疗，需要有在肿瘤细胞表面高表达的靶标。OFA/iLRP是分子量为37kDa的膜蛋白，在多种肿瘤细胞表面高表达，包括结肠癌、宫颈癌、卵巢癌、肺癌、纤维肉瘤、急性髓系白血病、淋巴瘤等。而在正常组织细胞中，OFA/iLRP仅在胚胎期及胎儿期表达于细胞表面，出生后消失，不在正常细胞表面表达。因此，OFA/iLRP有望成为一个良好的抗肿瘤靶点。

肿瘤靶向治疗还需要能特异性识别肿瘤靶标的配体，核酸适配体即为其中一种。核酸适配体是一种短链DNA或RNA分子，能够形成复杂的含有茎环、凸起、发夹、假结或G-四联体等的空间结构，从而与靶标特异性结合。它的靶标可以是蛋白质、多肽、核酸、氨基酸、细胞，甚至是一些金属离子等。此外，核酸适配体具有能够体外大量合成、价格便宜、稳定性好、便于储存等优点，有望为新的靶向治疗方法提供更好的策略。

核酸适配体应用于肿瘤靶向治疗，需要有较高的抵抗核酸酶的能力。因为体内存在大量的核酸酶，而普通的核酸适配体通常不能够抵抗核酸酶，在体内应用时很容易被核酸酶降解，从而失去结合靶标的能力。目前，以OFA/iLRP为靶标的具有抵抗核酸酶能力的核酸适配体尚未见报道。

发明内容

为了解决上述问题，本发明目的在于合成一种靶向OFA/iLRP的核酸适配体，该核酸适配体为一种新型核酸适配体，能够以较高的亲和力和特异性结合OFA/iLRP抗原，并且能够识别OFA/iLRP阳性的肿瘤细胞，同时与其他蛋白及阴性细胞的交叉结合较弱。此外，该适配体具有良好的抵抗核酸酶的能力，具有较好的体内应用潜能。为将来通过该核酸适配体将抗肿瘤药物靶向递送到OFA/iLRP阳性肿瘤细胞，并降低机体正常组织细胞对药物的摄取，从而实现肿瘤细胞的靶向杀伤提供实验基础。

为了实现上述目的，本发明提供一种靶向OFA/iLRP的核酸适配体，包含如SEQ IDNo.1所示核苷酸序列：5’-GTTGTTTGTATTGTTGTCTATCCTCTTAGGGATTT-3’。

本发明还提供上述的靶向OFA/iLRP的核酸适配体在作为用于检测和/或治疗OFA/iLRP阳性的肿瘤细胞的药物中的应用。

其中，所述OFA/iLRP阳性的肿瘤细胞为结肠癌细胞、宫颈癌细胞、卵巢癌细胞、肺癌细胞、纤维肉瘤细胞、急性髓系白血病细胞、淋巴瘤细胞。