[发明专利]CYR61蛋白在制备治疗与细胞迁移有关的疾病药物中的应用

说明书

本发明公开了CYR61蛋白在制备修复神经损伤药物中的应用，可通过外源性加入Cyr61蛋白或者内源性上调Cyr61蛋白的表达促进施万细胞增殖和迁移，从而实现神经损伤的修复。

技术领域

本发明属于神经科学研究领域，具体涉及CYR61蛋白在制备治疗与细胞迁移有关的疾病药物中的应用。

背景技术

Cyr61是与细胞外基质(ECM)相关的CCN家族信号蛋白一种分泌蛋白。它能够通过与细胞表面整合素受体和硫酸乙酰肝素蛋白聚糖的相互作用调节广泛的细胞活性，包括细胞粘附、迁移、增殖、分化、凋亡和衰老。以往的研究中发现，Cyr61刺激平滑肌细胞、成纤维细胞、内皮细胞和一些癌细胞的迁移。例如：Cyr61可以与其他促有丝分裂生长因子协同作用，通过整合素αvβ3增强成纤维细胞和内皮细胞中生长因子诱导DNA合成。这种作用机制也可能有助于其促进前列腺癌细胞和卵巢癌细胞中生长因子诱导的增殖能力，以及IL-17刺激的滑膜细胞的增殖。在神经系统中也有关于Cyr61的发现，例如：大鼠海马和皮质神经中检测到Cyr61的表达，并且海马中Cyr61 mRNA水平在胚胎发育期间较高而在出生后下降，这表明Cyr61可能与胚胎脑发育有关。另外，Cyr61作为一种海马神经元树突生长调节因子，以β1整合素依赖的方式控制树突生长；在成年人脑中，Cyr61 mRNA在整个中枢神经系统中被检测到，其中有针对脊髓，额叶，颞叶和枕骨，海马和尾状核的表达；小胶质细胞中Cyr61的上调可能有助于胶质瘤的发生；在丛状神经纤维瘤中Cyr61的表达增高。Cyr61在组织修复中也有一定作用，例如：在皮肤伤口愈合的炎症阶段，Cyr61可促进细胞的吞噬作用或凋亡细胞的吞噬清除；在皮肤伤口愈合过程中，Cyr61能通过促进角质形成细胞的迁移和增殖来加速再上皮化；Cyr61可与整合素α6β1共同作用触发肌成纤维细胞衰老，缓解过量的基质沉积所导致的纤维化、瘢痕形成和组织功能丧失。已有的研究表明Cyr61具有多种生物学功能，但其在施万细胞及周围神经损伤修复中的作用尚未见报道。

施万细胞(以生理学家Theodor Schwann命名)是周围神经系统(PNS)中的主要神经胶质细胞，为神经元提供必要的物理和营养支持，施万细胞形成围绕轴突的髓鞘，以维持周围神经的正常生理功能。成年中枢神经系统(CNS)损伤后轴突再生困难，但在周围神经系统中即使严重受伤后仍保留有一定的再生能力，施万细胞作为周围神经中的主要成分是影响其再生能力的主要因素之一。周围神经损伤后发生瓦勒变性(Walleriandegemeration)，轴突变性、髓鞘崩解、炎症细胞浸润，施万细胞作为损伤部位主要的细胞发挥着重要的作用，其增殖和迁移，沿着基底膜管排列成Bungner带，引导轴突的再生，并能帮助清除轴突和髓鞘碎片，为后续的轴突再生提供路径；同时施万细胞还可以分泌多种细胞因子和蛋白质为损伤后神经元轴突的再生提供良好的支持，损伤后施万细胞构成的微环境比中枢神经系统(CNS)的微环境更利于再生，因此，剖析施万细胞复杂的生物学功能，研究其分泌蛋白质的功能，发现其发挥作用的因子，不仅是针对与施万细胞相关的发育或者疾病，也对轴突退化和再生相关的许多疾病有重要的意义，可为神经系统损伤后修复提供新的策略。

发明内容

本发明通过建立原代培养大鼠施万细胞蛋白质表达谱和分泌谱的研究方法，通过质谱检测获得其蛋白质表达谱和分泌蛋白质表达谱，对分泌谱进行功能分类以及亚细胞定位，发现信号分子Cyr61蛋白与施万细胞粘附和迁移功能相关。

本发明具体技术方案如下：

CYR61蛋白在制备修复神经损伤药物中的应用。

富含半胱氨酸的蛋白61(Cysteine rich protein 61，Cyr61/CCN1)氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。

所述的应用，所述神经损伤为周围神经损伤。具体可以通过外源性加入Cyr61蛋白或者内源性上调Cyr61蛋白的表达促进施万细胞增殖和迁移，从而实现神经损伤的修复。