[发明专利]微生物菌液与血清囊泡反应在检测微生物感染中的应用

说明书

本发明公开了微生物菌液与血清囊泡反应在检测微生物感染中的应用。发明人在研究中意外发现，患者的血清提取物会与菌液产生凝集反应，通过检测凝集块的数目及类型，可以方便快捷准确地确定微生物感染的类型。本发明的一些实例，可以方便快速地检测出微生物感染，其检测结果可靠，可以更好地指导临床用药。

技术领域

本发明涉及微生物感染检测领域，特别涉及微生物菌液与血清囊泡反应在检测微生物感染中的应用。

背景技术

骨折内固定术后感染是骨科医生所面临的临床难题之一，原因在于其诊断时常困难，治疗相对棘手，一旦不能及时有效控制感染，极易产生慢性骨髓炎，导致感染迁延不愈、复发率高、致残率高。同时，骨折内固定术后感染也是灾难性的，给患者及其家庭带来沉重的社会、经济负担。早期准确诊断与合理规范治疗是提高治愈率、降低复发率与致残率、恢复肢体功能、改善患者生活质量的关键。

现有诊断骨折内固定术后感染特异性细菌种类的方法主要为微生物的培养与鉴定，通过手术取出特异性组织进行微生物的培养，培养出特异性微生物后，诊断即可成立。而聚合酶链反应(PCR)技术在细菌鉴定方面具有方便，快捷、高分辨率与高敏感型等优势，也逐渐成为诊断特异性感染的常用方法。

在现有诊断方法中，对于微生物的培养与鉴定而言，其培养率较低也成为影响其发展的重要因素之一，为了提高术中感染组织培养的阳性率，不建议术前常规应用抗生素治疗。而对于有明确与外界相通窦道的患者，由于存在外界污染因素，使其细菌培养结果可信度较低。此外，微生物培养需要时间较长，在此期间需经验性使用抗生素，对患者病情的治疗产生一定影响。对于PCR技术而言，由于其尚处于探索阶段，加之其存在一定的缺陷，如标本污染易导致假阳性、不能鉴别细菌存活状态、提供的药敏信息有限等，不建议将该技术作为微生物鉴定的常规检测方式。

现有技术中，缺乏一种快速有效、可信度高的微生物感染检测技术。

发明内容

本发明的目的在于克服现有技术的不足，提供菌液在制备微生物感染检测试剂盒中的应用。

发明人在研究中意外发现，患者的血清提取物会与菌液产生凝集反应，通过检测凝集块的数目及类型，可以方便快捷准确地确定微生物感染的类型。

本发明所采取的技术方案是：

微生物菌液在制备对应微生物感染检测试剂盒中的应用，优选的，所述检测通过将微生物菌液与血清囊泡接触反应实现。

在一些应用的实例中，所述微生物感染为骨折内固定术后微生物感染。

在一些应用的实例中，所述试剂盒的检测对象为患者的血清提取物。

在一些应用的实例中，所述血清提取物为囊泡。

在一些应用的实例中，所述囊泡的提取方法如下：

1)取静脉血4℃离心，3000g4℃离心10min，分离血清；

2)将血清转移至离心管中，4000g4℃离心10min，收集上清液；

3)将上清经5μm过滤器过滤，取滤液；

4)将滤液100,000g4℃离心1h，取原血清1/5体积的HBSS盐溶液重悬得到所述囊泡。

在一些应用的实例中，所述微生物为金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、表皮葡萄球菌和大肠杆菌中的至少一种。

在一些应用的实例中，所述微生物菌液使用的溶液为添加有防冻剂的水性溶液，优选的防冻剂为10～20v/v％DMSO。

在一些应用的实例中，所述微生物菌液中，单一微生物的浓度为(2～9)×10⁸CFU/mL，优选为(2～3)×10⁸CFU/mL。