[发明专利]双键聚合和酶抑制剂组合处理的生物瓣膜材料制备及保存方法

说明书

本发明公开了一种双键聚合和酶抑制剂组合处理的生物瓣膜材料制备及保存方法，制备方法包括如下步骤：a.将鱼鳔进行裁剪并脱细胞；b.将脱细胞的鱼鳔浸泡在甲基丙烯酸缩水甘油酯溶液以及引发剂中进行双键聚合交联；c.采用糖胺多糖酶抑制剂浸泡；d.采用碳二亚胺和N‑羟基丁二酰亚胺混合溶液进行交联固定；e.漂洗后采用抑菌溶剂保存或采用醇溶液脱水干燥后保存。本发明制备的生物瓣膜材料，提高了糖胺多糖的稳定性以及抗钙化性能，是一种具有应用前景的新型生物瓣膜材料。

技术领域

本发明属于生物瓣膜材料技术领域，具体涉及一种双键聚合和酶抑制剂组合处理的生物瓣膜材料制备及保存方法。

背景技术

当前市场上的人工生物心脏瓣膜材料主要采用猪或牛的心包膜作为原材料，并用戊二醛溶液交联制备而成。猪或牛的心包膜材料来源有限，特别是当出现大规模动物疫情时，原材料的采集以及运输不便。并且戊二醛交联的心包膜制备的人工生物瓣膜，因为钙化等问题导致其目前使用寿命只有10年左右。基于此，开发新型具有抗钙化性能的生物瓣膜材料具有重要的临床价值和社会意义。

发明内容

本发明的目的在于：为了解决现有技术中存在的不足，提供一种双键聚合和酶抑制剂组合处理的生物瓣膜材料制备及保存方法，能够提升生物瓣膜糖胺多糖稳定性及抗钙化性能，潜在地延长其使用寿命。

本发明采用的技术方案如下：

一种双键聚合和酶抑制剂组合处理的生物瓣膜材料制备方法，包括以下步骤：

a.裁剪鱼鳔并脱细胞，得到脱细胞的鱼鳔；

b.将步骤a所得脱细胞的鱼鳔浸泡在甲基丙烯酸缩水甘油酯溶液以及引发剂中进行双键聚合交联，得交联固定的鱼鳔；

c.将步骤b所得交联固定的鱼鳔采用多酚糖胺多糖酶抑制剂浸泡；

d.将步骤c所得浸泡后材料采用碳二亚胺和N-羟基丁二酰亚胺混合溶液进行交联固定，漂洗，即得。

鱼鳔的组成成分与动物心包膜相似，主要成分包括胶原蛋白，弹性蛋白以及糖胺多糖。采用鱼鳔作为替代动物心包膜的生物瓣膜材料显示出更好的抗钙化性能，相当的力学性能。采用基丙烯酸缩水甘油酯修饰的猪心包膜的双键聚合交联，相比于戊二醛交联的心包膜，具有更好的弹性蛋白稳定性已经抗钙化性能。采用糖胺多糖酶抑制剂和碳二亚胺组合处理动物心包膜，相比于戊二醛交联的心包膜，可以有效提高糖胺多糖、弹性蛋白的稳定性以及抗钙化性能。

本发明采用双键聚合和糖胺多糖酶抑制剂组合处理制备的鱼鳔生物瓣膜材料，与现有猪或牛心包膜生物瓣膜材料以及现有戊二醛交联的鱼鳔生物瓣膜材料相比，提高了糖胺多糖、弹性蛋白的稳定性以及抗钙化性能，是一种具有应用前景的新型生物瓣膜材料。

进一步地，鱼鳔取自鲤鱼、草鱼、鲫鱼、鲢鱼、鳙鱼、鳊鱼、黄花鱼、鲟鱼、鲅鱼或石首鱼。

进一步地，步骤a中脱细胞具体为：将鱼鳔放置于0.1-1wt％的十二烷基硫酸钠和0.1-1wt％的脱氧胆酸钠等体积混合的混合溶液中浸泡24-48h，然后在无菌PBS溶液中漂洗1-2d；优选为鳔放置于0.5wt％十二烷基硫酸钠和0.5wt％脱氧胆酸钠等体积混合的混合溶液中常温处理24h。

进一步地，步骤b中引发剂包括：过硫酸钾、过硫酸铵、亚硫酸氢钠和四甲基乙二胺中的至少一种；所述进行双键聚合交联具体为：将脱细胞的鱼鳔浸泡于1-10wt％的甲基丙烯酸缩水甘油酯溶液当中3-7d，然后加入引发剂在20-45℃的条件下进行热引发双键聚合反应12-48h；优选为浸泡于5wt％的甲基丙烯酸缩水甘油酯溶液当中3天，然后使用过硫酸钾引发剂在37℃的条件下进行热引发双键聚合24小时。