[发明专利]一种干血斑中多种元素的检测方法

说明书

本发明公开了一种干血斑中多种元素的检测方法，包括步骤：取干血斑卡片样本上的血斑及空白斑点，分别加入消解液，混匀后静置，超声提取，离心，得试样溶液和空白溶液；提供待测元素的混合标准溶液和内标使用液；将待测元素的混合标准溶液、试样溶液、空白溶液用电感耦合等离子体质谱法进行检测，在线加入内标使用液，测定干血斑中多种元素的含量。相较于传统全血样品，本发明以干血斑为样本，采样方法创伤小，取样方便。本发明建立的检测方法达到了极低的检出限，能够满足对干血斑中极微量元素的检测，且检测的灵敏度和准确度高，检测的稳定性好。

技术领域

本发明涉及生物技术检测领域，具体涉及一种干血斑中多种元素的检测方法。

背景技术

目前，对人体内微量元素检测的样本类型大多为全血或血清，血清测定的缺点较多，如采血量较多，离心前的静置时间也会对血清的元素浓度有不同程度的干扰；在分离过程中，也易发生溶血现象，因此会引起较大的误差。此外，血清中很多金属元素(Fe、Cu、Zn、Mn、Hg等)的浓度会比全血中的低，尤其针对慢性重金属中毒事件，一些重金属元素部分存在于血细胞中，因此血清中的元素浓度不能完全代表体内的元素水平。

全血检测的采血量一般在1mL以上，样本需求量大；采血需由专业人员操作，有一定的病原体感染风险；全血样本需冷冻保存，且不易于运输。在临床上或临床实验中如需反复多次采血检测矿物质重金属，全血采样方式将给病人带来一定的痛苦及生理负担。对干血斑(driedblood spots，DBS)采样法，最早由Robert Guthrie在1963年提出，即通过使用一次性采血针扎指尖、耳垂或足后跟等部位，用移液管吸取血液或直接滴在滤纸上进行采样的方法。相比于常规的全血采集方式，干血斑采样方法创伤小，感染概率低，多通过足跟、脚趾、手指取血，取样十分方便，且样本稳定，易于长期保存。但干血斑因为其样本量(约20μL)低，相较于直接采用全血，对方法的灵敏度要求更高，检测难度大。

因此，有必要研究一种灵敏度和准确度高、稳定性好的测定干血斑中多种元素的方法。

发明内容

为解决上述问题，本发明的目的在于提供一种干血斑中多种元素的检测方法，该方法可以达到极低的检出限，能够满足对干血斑中极微量元素的检测，且检测的灵敏度和准确度高，检测的稳定性好。

本发明是通过以下技术方案实现：

一种干血斑中多种元素的检测方法，包括以下步骤：

(1)取干血斑卡片样本上的血斑及空白斑点，分别加入消解液，混匀后静置，超声提取，离心，得试样溶液和空白溶液；所述消解液为硝酸、半胱氨酸和曲拉通的混合水溶液；

(2)提供待测元素的混合标准溶液和内标使用液；

(3)将待测元素的混合标准溶液、试样溶液和空白溶液用电感耦合等离子体质谱法进行检测，在线加入内标使用液，测定干血斑中多种元素的含量。

本发明以干血斑为样本，干血斑因为其样本量低，相较于直接采用全血，对方法的灵敏度要求更高，检测难度大。因此，在前处理过程中需要将吸附在干血斑卡片上的矿物质和金属元素完全萃取下来，保证萃取效率以保证结果的准确性。由于汞元素在干血斑中浓度极低且容易吸附管路使得元素残留而导致样本检测的不准确，本发明经研究发现，在消解液中加入一定量的半胱氨酸，可以稳定汞元素，进而提高检测的准确性。

因消解液对多种元素的提取具有关键影响，本发明进一步对消解液的组成进行了优化，具体方法如下：