[发明专利]一种羊肚菌菌种保藏方法

说明书

一种羊肚菌菌种保藏方法，包括以下步骤：第一步、制作菌种保藏培养基；取小麦、木屑、麦麸以及贫营养黄土，首先将小麦浸透水后捞出，然后与木屑和麦麸搅拌均匀得到初始培养基，将初始培养基装入培养瓶中，再在初始培养基上铺设滤纸，滤纸上覆盖贫营养黄土，封闭瓶口并进行高压灭菌，取出冷却后得到含菌种培养基的培养瓶；第二步、接种培养；在无菌条件下，将分离提纯的羊肚菌试管种接入由第一步得到的培养瓶当中，直至羊肚菌菌丝在瓶内长满；第三步、菌核培育；第四步、冷冻保藏。本发明克服了羊肚菌试管菌种保藏老化或退化严重的问题，而且菌种保藏量大，能够减少菌种扩繁次数，诱发子实体的形成，可直接用于大田生产。

技术领域

本发明属于菌类培育领域，具体涉及一种羊肚菌菌种保藏方法。

背景技术

羊肚菌是一种珍稀的食药两用菌，味道鲜美，脆嫩可口，属高级营养滋补品，富含蛋白质、多糖、碳水化合物、多种维生素、20多种氨基酸以及多种微量元素，被誉为菌中之王，具有补肾壮阳、补脑、提神之功效，长期食用可防癌抗癌，抑制肿瘤，预防感冒，增强人体免疫力，既是宴席上的珍品，又是医药中久负盛名的良药，已成为高端消费和出口创汇的高档食品。近年来随着羊肚菌基础研究的不断深入和种植经验的积累，羊肚菌人工栽培技术也日趋成熟，种植规模迅速扩大，已由2012年的3000亩左右发展到2019年的15万亩以上。但在羊肚菌的生产中同时也出现了很多问题，出菇不稳定或大面积不出菇，产量高低参差不齐，经济效益差距大，其很大原因是菌种质量不高或菌种保存不当导致老化和退化造成的。

发明内容

本发明的目的在于针对羊肚菌菌种保藏易老化或退化的难题，提供一种羊肚菌菌种保藏方法，操作简便易行，并且所栽培的羊肚菌出菇性能好、生长整齐健壮、产量高质量好。

为了实现上述目的，本发明包括以下步骤：

第一步、制作菌种保藏培养基；

取小麦、木屑、麦麸以及贫营养黄土，首先将小麦浸透水后捞出，然后与木屑和麦麸搅拌均匀得到初始培养基，将初始培养基装入培养瓶中，再在初始培养基上铺设滤纸，滤纸上覆盖贫营养黄土，封闭瓶口并进行高压灭菌，取出冷却后得到含菌种培养基的培养瓶；

第二步、接种培养；

在无菌条件下，将分离提纯的羊肚菌试管种接入由第一步得到的培养瓶当中，封闭瓶盖，置于14±2℃、微光条件下进行培养，直至羊肚菌菌丝在瓶内长满；

第三步、菌核培育；

置于5～8℃、避光条件下继续培养，直到形成大量菌核并达到生理成熟；

第四步、冷冻保藏；

将菌种培养瓶置于冰箱当中，缓慢降低温度至-8℃条件下冷冻保藏。

优选的，所述的第一步培养基按质量分数计量取小麦90％、木屑5％、麦麸5％。

优选的，所述的第一步得到的初始培养基中水分按质量分数计量占65％。

优选的，所述的第一步将初始培养基装入500ml的培养瓶中至瓶容积的40％～50％。

优选的，滤纸上覆盖贫营养黄土至培养瓶容积的70％～80％。

优选的，所述的贫营养黄土中拌入石灰粒，贫营养黄土当中的含水量为75％～80％。

优选的，所述的第一步通过内有2层无纺布的透气瓶盖封闭瓶口，将所述培养瓶放在高压灭菌锅里进行高压灭菌，设置温度在121℃～126℃条件下灭菌150～180min。

优选的，所述的第二步将羊肚菌试管种对应得到的培养瓶接入时一支试管种接种5～6瓶。

优选的，所述的第二步羊肚菌试管种在培养瓶当中的培养时间为10～15天。