[发明专利]一种烟草中硝苯菌酯及其代谢物残留量的检测方法

说明书

本发明公开了一种烟草中硝苯菌酯及其代谢物残留量的检测方法，烟草样品采用乙腈超声提取，气相色谱‑负化学源串联质谱法检测。该检测方法样品前处理简单、快速，灵敏度、准确度和精密度均符合农药残留检测要求，适用于烟草中硝苯菌酯及其代谢物残留量的同时检测。

技术领域

本发明属于农药残留检测技术领域，具体涉及一种烟草中硝苯菌酯及其代谢物残留量的检测方法。

背景技术

硝苯菌酯是一种新型的白粉病杀菌剂，对梨果类、葫芦科作物、核果类、柑橘、烟草及蔬菜和观赏性植物等作物上的白粉病均具有良好的防治效果，同时对于一些植食性的螨虫也具有一定的抑制效果。硝苯菌酯是从敌螨( dinocap，CAS: 39300-45-3) 6种异构体中分离出来的单一异构体，由于其防治效果突出，该药已在欧洲、美国等国家使用多年，2018年在中国登记使用。国际上对硝苯菌酯的最高残留限量（MRL）要求非常严格，对其残留的检测十分重视。目前欧盟已制定了多种农产品中硝苯菌酯的最大残留限量 (MRL，硝苯菌酯和代谢物之和)，如在柑橘、苹果、梨和芒果中的MRL为0.05mg/kg，在葡萄中的MRL为1 mg/kg，在草莓中的MRL 为3 mg/kg。中国 香港规定葡萄、草莓、瓜、黄瓜、西葫芦中的MRL分别为0.2、0.3、0.5、0.7和0.7 mg/kg。烟草是我国重要的经济作物，农药残留问题在烟叶安全问题上的重要性日益突出，为保障烟叶质量安全，很有必要建立快速、准确、灵敏的烟草及烟草制品中硝苯菌酯及代谢物残留量的检测方法。

硝苯菌酯（2,4-DNOPC）不稳定，容易光解或水解成相应的代谢物（2,4-DNOP），目前有关硝苯菌酯残留检测报道的方法主要有高效液相色谱法、液相色谱-质谱联用法，这些方法不能直接测定硝苯菌酯及代谢物，需对样品中硝苯菌酯提取后再水解成对应的酚，通过分析其对应的水解产物酚的残留量来计算硝苯菌酯的残留量，方法较为繁琐费时。因此，开发一种能解决上述问题的方法是非常必要的。

发明内容

本发明的目的在于提供一种烟草中硝苯菌酯及其代谢物残留量的检测方法。

本发明的目的是这样实现的，所述的烟草中硝苯菌酯及其代谢物残留量的检测方法包括前处理和检测步骤，具体包括：

A、前处理：

1）样品处理：准确称取待测样品1g于50mL离心管中，加入10ml乙腈，超声处理提取后经一次离心、震荡吸附和二次离心制备得到待测样品液a；

2）标准溶液配制：分别精确称取硝苯菌酯（2,4-DNOPC）和硝苯菌酯代谢物（2,4-DNOP）标准品，分别用甲醇溶解定容配制得到1mg/ml的硝苯菌酯标准母液b和硝苯菌酯代谢物母液c，用烟草空白基质提取液将硝苯菌酯母液b稀释成0.005、0.01、0.02、0.05、0.1mg/L的基质匹配标准工作溶液，将硝苯菌酯代谢物母液c稀释成0.02、0.05、0.1、0.2、0.5mg/L的基质匹配标准工作溶液，分别以硝苯菌酯和硝苯菌酯代谢物的质量浓度为横坐标（X），硝苯菌酯和硝苯菌酯代谢物的峰面积为纵坐标（Y），分别制作硝苯菌酯和硝苯菌酯代谢物的基质校准曲线；

B、检测：将待测样品液a经气相色谱负化学源串联质谱法检测，并结合标准曲线测得硝苯菌酯和硝苯菌酯代谢物残留量。

本发明采用气相色谱-负化学源串联质谱仪同时测定烟草中的硝苯菌酯和硝苯菌酯代谢物，样品采用有机试剂超声提取，无需水解，极大的简化了操作步骤，节省了时间。

与现有技术相比，本发明的有益效果：

1、本发明创造性的采用快速、简单、可靠的提取方法用于烟草样品中硝苯菌酯及代谢物的提取，采用高选择性高灵敏度的气相色谱负化学源串联质谱法测定烟草中硝苯菌酯及代谢物的残留量，相比现有技术，本发明的检测方法具有样品前处理更简便的特点，无需水解，能完全满足硝苯菌酯及代谢物的残留检测要求。