[发明专利]一种囊胚培养液及其制备方法

说明书

本发明公开了一种囊胚培养液及其制备方法。包括水、无机盐、能量物质、氨基酸，维生素、抗氧化剂、抗菌剂、大分子物质、指示剂，缓冲系统，其特征在于，所述的能量物质包括葡萄糖、乳酸钠、丙酮酸钠，其中葡萄糖4.1~6.0mmol/L，乳酸钠2.5~4.5mmol/L，丙酮酸0.65~0.95mmol/L。本发明所述的囊胚培养液具有高葡萄糖，低丙酮酸钠及乳酸钠的特点，匹配卵裂胚至囊胚期间胚胎对能力物质利用特点的，有效促进胚胎的发育。此外，针对性地必需氨基酸的比例，降低非必需氨基酸的比例，为该时期胚胎发育所需的特殊营养物质，满足该时期对营养物质的需求，同时避免加入过多非必需氨基酸造成降解成分对胚胎产生毒性作用。

技术领域

本发明属于人类辅助生殖领域，具体涉及一种囊胚培养液及其制备方法，其是主要用于卵裂胚至卵囊胚期间胚胎培养，为胚胎体外培养提供发育环境及所需的营养物质。

背景技术

囊胚培养液是辅助生殖技术中必不可少的试剂产品，应用于卵裂胚至卵囊胚期间胚胎培养，在辅助生殖医学技术中应用为该时期培养体外培养提供必需的环境和营养。囊胚培养液的用途：在辅助生殖中心胚胎实验室的二氧化碳培养箱环境下对人的卵裂胚至卵囊胚期间胚胎培养。

目前，国内辅助生殖用液依赖进口，而国内暂无对这类产品进行自主生产，缺乏议价空间，价格高昂从而患者的医疗成本较高，增加了经济负担。进口产品往往需要通过长途运输，长途运输过程中因存储条件无法得到保证，运输时间较长，使得培养液使用效果下降，无法对临床的胚胎培养提高最佳效果，直接影响胚胎的发育，造成不良后果。在国内生产人类辅助生殖医学技术培养液，避免了国外进口产品因长途运输带来的不明因素，减轻患者的经济负担。

目前，临床使用的常规囊胚培养液的所提供的能量物质并不能很好地贴合该时期胚胎对物质能量的需求，不能为该时期胚胎的培养提供最佳的能量需求，有效促进胚胎体外生长发育。本发明在对该时期物质需求研究基础上，在培养液中提供高浓度的葡萄糖，低浓度的丙酮酸钠及乳酸钠，以便更好地贴合该时期胚胎能量物质的需求，促进该时期胚胎细胞生长发育。此外，常规囊胚培养液通常添加无明显浓度差异水平的非必需氨基酸及必需氨基酸，并没有充分考虑卵裂胚至囊胚期间胚胎对两类氨基酸的需求的差异，会导致培养后期营养物质供给失衡及氨基酸降解的氨对胚胎产生毒性作用，胚胎发育受到抑制。常规囊胚培养液往往存在抗氧化能力不足的现象，抗氧化性低会导致氧化物对胚胎产生毒害作用。

发明内容

本发明的目的在于提供一种能量物质配比适宜、满足胚胎发育特殊营养需求及抗氧化性强的囊胚培养液，不仅能为卵裂胚至囊胚期间胚胎体外培养提供充足的物质营养需求，提高囊胚率，也为胚胎体外培育提供良好的发育环境，降低培养过程中环境中过自身产生的氧化物对胚胎的毒害作用，为胚胎体外培养提供理想的环境。

为实现上述目标，本发明所提供的技术方案是：

一种囊胚培养液，包括水、无机盐、能量物质、氨基酸，维生素、抗氧化剂、抗菌剂、大分子物质、指示剂，缓冲系统，其特征在于，所述的能量物质包括葡萄糖、乳酸钠、丙酮酸钠，其中葡萄糖4.1~6.0mmol/L，乳酸钠2.5~4.5mmol/L，丙酮酸0.65~0.95mmol/L。

所述的氨基酸包括丙氨酰谷氨酰胺、非必需氨基酸和必需氨基酸，其中丙氨酰谷氨酰胺1.52~2.14mmol/L，非必需氨基酸0.002~0.011g/L，必需氨基酸0.008~0.165g/L。

优选，柠檬酸钠的浓度为1.05~3.40mmol/L 、谷胱甘肽的浓度范围为1.05~3.40mmol/L。

优选，所述无机盐包括氯化钠85.0~110.0mmol/L、硫酸镁0.10~0.90mmol/L、磷酸二氢钾0.42~0.78mmol/L、氯化钾4.3~8.1mmol/L和氯化钙1.6~4.2mmol/L。

优选，所述维生素浓度为0.001~0.003g/L。