[发明专利]一种卵裂胚培养液及其制备方法

说明书

本发明公开了一种卵裂胚培养液及其制备方法。它包括水、无机盐、能量物质、螯合剂、抗氧化剂、抗菌剂、大分子物质、指示剂，其特征在于，所述的抗氧化剂是柠檬酸钠、谷胱甘肽，柠檬酸钠的浓度为0.85~1.12mmol/L、谷胱甘肽的浓度范围为0.91~1.15mmol/L。本发明所述的卵裂胚培养液中高浓度丙酮酸钠及乳酸钠作为能量物质的同时，与柠檬酸钠及谷胱甘肽联合作为抗氧化剂，四种抗氧化剂联合发挥作用能有效减低环境及自身产生的氧化物对胚胎的毒害，为胚胎体外发育营造良好的发育环境。

技术领域

本发明属于人类辅助生殖领域，具体涉及一种卵裂胚培养液及其制备方法，其是主要用于原核期至卵裂期胚胎培养，为胚胎体外培养提供发育环境及所需的营养物质。

背景技术

卵裂胚培养液是辅助生殖技术中必不可少的试剂产品，应用于原核期至卵裂期胚胎培养，在辅助生殖医学技术中应用为该时期培养体外培养提供必需的环境和营养。卵裂胚培养液的用途：在辅助生殖中心胚胎实验室的二氧化碳培养箱环境下对人的原核期至卵裂期胚胎进行培养。

目前，国内辅助生殖用液依赖进口，而国内暂无对这类产品进行自主生产，缺乏议价空间，价格高昂从而患者的医疗成本较高，增加了经济负担。进口产品往往需要通过长途运输，长途运输过程中因存储条件无法得到保证，运输时间较长，使得培养液使用效果下降，无法对临床的胚胎培养提高最佳效果，直接影响胚胎的发育，造成不良后果。在国内生产人类辅助生殖医学技术培养液，避免了国外进口产品因长途运输带来的不明因素，减轻患者的经济负担。

目前，临床使用的常规卵裂胚培养液的在提供较高浓度的丙酮酸钠及乳酸钠的同时，亦会提供相对较高浓度的葡萄糖成分或不提供葡萄糖，但两种提供葡萄糖的方式均对该时期胚胎细胞的发育有阻滞影响，不利于该时期胚胎发育。本发明在提供高浓度的丙酮酸钠及乳酸钠的同时，提供低浓度的葡萄糖，促进该时期胚胎细胞生长发育。此外，常规卵裂胚培养液通常添加相近浓度水平的非必需氨基酸，并没有充分考虑原核期至卵裂期胚胎对特定氨基酸的需求，会导致培养后期营养物质供给失衡，胚胎发育受到抑制。常规卵裂胚培养液往往存在抗氧化能力不足的现象，抗氧化性低会导致氧化物对胚胎产生毒害作用。

发明内容

本发明的目的在于，提供一种能量物质配比适宜、满足胚胎发育特殊营养需求及抗氧化性强的卵裂胚培养液，不仅能为原核期至卵裂期胚胎体外培养提供充足的物质营养需求，提高卵裂率，也为胚胎体外培育提供良好的发育环境，降低培养过程中环境中过自身产生的氧化物对胚胎的毒害作用，为胚胎体外培养提供理想的环境。

为实现上述目标，本发明所提供的技术方案是：

一种卵裂胚培养液，包括水、无机盐、能量物质、螯合剂、抗氧化剂、抗菌剂、大分子物质、指示剂，其特征在于，所述抗氧化剂为柠檬酸钠、谷胱甘肽，所述柠檬酸钠的浓度为0.80~2.40mmol/L、谷胱甘肽的浓度范围为0.80~2.40mmol/L。进一步优选为柠檬酸钠的浓度为0.85~1.12mmol/L、谷胱甘肽的浓度范围为0.91~1.15mmol/L。

优选，所述的能量物质包括乳酸钠、丙酮酸钠、葡萄糖，其中乳酸钠的浓度为24.0~29.0mmol/L，丙酮酸钠的浓度为1.1~2.3mmol/L，葡萄糖的浓度为0.05~0.3mmol/L。所述的丙酮酸钠、乳酸钠除作为能量物质外亦是抗氧化剂，丙酮酸钠、乳酸钠、柠檬酸钠、谷胱甘肽作为抗氧化剂联合使用。

优选，所述的氨基酸包括丙氨酰谷氨酰胺和非必需氨基酸，所述的丙氨酰谷氨酰胺浓度为0.80~1.30mmol/L，所述的非必需氨基酸包括丙氨酸、天冬酰胺、天冬氨酸、谷氨酸、甘氨酸、脯氨酸、丝氨酸，其中甘氨酸浓度为2.50~5.30mmol/L、丙氨酸浓度为2.50~5.30mmol/L、丝氨酸浓度为2.50~5.30mmol/L，天冬酰胺浓度为0.50~1.20mmol/L、天冬氨酸浓度为0.50~1.20mmol/L、谷氨酸浓度为0.50~1.20mmol/L、脯氨酸浓度为0.50~1.20mmol/L。