[发明专利]用于男性生育力诊断的试剂盒

说明书

本发明公开了一种分子标记物miR‑122,核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。还公开了一种用于男性生育力诊断试剂盒,用于测定精液中所述的分子标记物miR‑122表达量的试剂，通过所述miR‑122的表达量提示受精率和囊胚形成率。本发明通过检测精液中miR‑122的表达量，可以判断受精、胚胎发育及临床妊娠情况，为男性生育力判断提供了一种简便易操作，灵敏度高的方法，可作为评估男性生育能力的新指标。

技术领域

本发明涉及医疗检测领域，特别是涉及一种用于男性生育力诊断的试剂盒。

背景技术

不育症是一种特殊的生殖健康缺陷，常给家庭、社会造成严重影响。全世界不孕不育的发病率高达15％，在不孕不育患者中，单纯男性因素导致的不育症占20％，男女双方因素占30-40％。准确判断男性生育力是诊断不育及合理治疗的前提。精子浓度、精液体积、精子总数、精子活力、精子形态等常规精液指标是评估男性生育力的“金标准”，但研究指出常规精液参数并不能准确反映男性生育状态，约15％常规参数正常的患者患有不育症。目前，不育症评估缺乏分子诊断指标，因此，有必要寻找指示男性生育力的新指标。

发明内容

本发明的一个目的是解决至少上述问题，并提供至少后面将说明的优点。

本发明还有一个目的是提供一种分子标记物miR-122，通过该分子标记物的表达量，可判断受精、胚胎发育及临床妊娠情况。

本发明还有一个目的是提供一种用于男性生育力诊断的试剂盒，采用该试剂盒的试剂可检测分子标记的表达量。

为实现上述目的，本发明提供了如下方案：

本发明提供一种分子标记物miR-122，核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。

优选的是，所述miR-122来源于精液。

本发明还提供一种用于男性生育力诊断的试剂盒,用于测定精液中所述的分子标记物miR-122表达量的试剂，通过所述miR-122的表达量提示受精率和囊胚形成率。

优选的是，所述试剂盒包括反转录体系、PCR反应体系和内参U6。

优选的是，所述反转录体系每25μL包含：5×pap/RT Buffer 5μL，RTase Mix 1μL，25U/μL PoLy A PoLymerase 1μL，模板RNA 18μL。

优选的是，反转录的反应条件为：37℃60min，85℃5min，将RNA反转为cDNA。

优选的是，PCR扩增体系每20μL包括：2×qPCR Mix 10μL，通用引物2μL，正向引物2μL,50×ROX染料0.1μL，cDNA 2μL，ddH₂O 3.9μL。

优选的是，扩增条件为：95℃10min；95℃10sec，60℃30sec，45个循环。

本发明公开了以下技术效果：

本发明提供了一种分子标记miR-122，该分子标记miR-122来源于精液中，并且可以根据其表达量无创性评估受精能力、胚胎体外发育能力在内的男性生育力，为不育患者的早期发现、诊断和治疗提供依据。

本发明公开的用于男性生育力诊断的试剂盒，具体以定量PCR为基础，从精液中直接提取miR-122，检测其表达量，用于结果评估，相比传统精子活力和计数方法，本发明可以更快速和准确的评估男性生育力，有利于为男性生育力医学实验提供一种新的方法。

附图说明

为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本发明的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。