[发明专利]一种核酸扩增仪的光学激发和检测方法

权利要求书

1.一种核酸扩增仪的光学激发和检测方法，其特征在于，所述核酸扩增仪包括控制系统，所述控制系统包括控制组和被控元件，所述控制组包括控制器和人机交互面板，所述被控元件分别与控制器电连接，所述被控元件包括第一温度传感器组、第二温度传感器组、第一流速传感器组、第二流速传感器组、第三流速传感器组、第一液位传感器组、第二液位传感器组、灯具控制装置、散热风机、第一控制阀、述泵体、第二控制阀、限流阀、转动柱和输出物控制阀；

其中，所述第一温度传感器组设置在第一反应腔内，以检测所述第一反应腔内的实时温度T1；所述第二温度传感器组设置在第二反应腔内，以检测所述第二反应腔内的实时温度T2；所述第一流速传感器组设置在导流管道上，且设置在中间物输出装置前端，以检测从所述第一反应腔流出的物料的实时流速V1；所述第二流速传感器组设置在输出控制管道上，以检测中间物的实时流速V2；所述第三流速传感器组设置在回流管道上，以检测从所述第二反应腔内的流出的物料的实时流速V3；第一液位传感器组设置在所述第一反应腔内，以检测所述第一反应腔的实时液位高度H1；所述第二液位传感器组设置在所述第二反应腔内，以检测所述第二反应腔的实时液位高度H2；

所述光学激发和检测方法包括以下步骤：

步骤1、向第一反应腔内注入核酸；

步骤2、加热装置工作，以使所述第一反应腔内的核酸受热变性，第一温度传感器组开始对所述第一反应腔中的温度进行检测，当所述第一温度传感器组第一次检测到所述第一反应腔内的温度处于85℃-95℃时，控制器开始计时，所述控制器计时5-8分钟后第一控制阀打通，以使变性后的核酸经由导流管道进入第二反应腔；

步骤3、第二液位传感器组开始对所述第二反应腔中的液位高度进行检测，当所述第二液位传感器组测得的实时液位高度H2符合第一液位标准值时，中间物输出装置开始工作，输出物控制阀打开，以使输出物储存仓中的中间物流入所述第二反应腔中，所述输出物储存仓中存有引物、缓冲液和dNTP；

步骤4、所述第二液位传感器组继续保持对所述第二反应腔中的液位高度进行检测，当所述第二液位传感器组测得的实时液位高度H2符合第二液位标准值时，所述控制器控制散热装置开始工作以对所述第二反应腔进行降温；

步骤5、第二温度传感器组开始工作，当所述第二温度传感器组第一次检测到所述第二反应腔内的温度降到50℃时，所述第二反应腔内的加热装置开始工作，所述加热装置和所述散热装置共同工作以维持所述第二反应腔内的温度为45℃-55℃；

当所述第二温度传感器组第一次检测到所述第二反应腔内的温度降到50℃时，所述控制器开始计时，计时1-3分钟后所述控制器控制第二控制阀打开，同时所述控制器还控制泵体工作，以将所述第二反应腔内的核酸输送回所述第一反应腔中；

步骤6、所述控制器对荧光检测单元采集到的数据进行分析，并计算出系统稳定值Δs和衡量区间K的关系以选择相应的工作模式，检测单元包括第一荧光检测器和第二荧光检测器；所述第一荧光检测器对通过引流管道上的样品进行检测，检测出实时数据N1；所述第二荧光检测器对通过所述回流管道上的样品进行检测，检测出实时数据N2，其中，Δs＝N2-N1，衡量区间K的范围设定为[2N1/3，N1]：

当系统稳定值Δs处于衡量区间K内时，所述控制器继续保持正常工作模式；

当系统稳定值Δs不在衡量区间K内时，所述控制器进入诊断程序；

步骤7、设定所述步骤1到所述步骤6为一个循环反应，重复该循环反应20-30次。