[发明专利]一种通过基因编辑技术从番茄背景材料中创制多种果色材料的方法

权利要求书

1.一种番茄多果色材料的制备方法，为如下方法1)或2)：

1)所示的方法包括如下步骤：降低受体番茄材料基因组中的果实颜色调控蛋白PSY1、MYB12和SGR1中至少一种的活性或含量，得到目的番茄多果色材料；

2)所示的方法包括如下步骤：对所述受体番茄材料基因组中的果实颜色调控基因PSY1、MYB12和SGR1中至少一种进行基因编辑，得到目的番茄多果色材料。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：

所述降低受体番茄材料基因组中的果实颜色调控蛋白PSY1、MYB12和SGR1中至少一种的含量，或，所述对所述受体番茄材料基因组中的果实颜色调控基因PSY1、MYB12和SGR1中至少一种进行基因编辑，均通过CRISPR/Cas9系统对所述受体番茄材料基因组中的果实颜色调控基因PSY1、MYB12和SGR1中至少一种进行基因编辑。

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于：

所述蛋白PSY1为序列1所示的PSY1基因编码的蛋白；

所述蛋白MYB12为序列2所示的MYB12基因编码的蛋白；

所述蛋白SGR1为序列3所示的SGR1基因编码的蛋白；

或，所述基因PSY1的核苷酸序列为序列1；

或，所述基因MYB12的核苷酸序列为序列2；

或，所述基因SGR1的核苷酸序列为序列3。

4.根据权利要求2或3所述的方法，其特征在于：

所述CRISPR/Cas9系统中，PSY1基因编辑的sgRNAP1、PSY1基因编辑的sgRNAP2、MYB12基因编辑的sgRNAM1、MYB12基因编辑的sgRNAM2、SGR1基因编辑的sgRNAS1和SGR1基因编辑的sgRNAS2；

所述sgRNAP1的靶序列为序列6所示的DNA分子；

所述sgRNAP2的靶序列为序列7所示的DNA分子；

所述sgRNAM1的靶序列为序列8所示的DNA分子；

所述sgRNAM2的靶序列为序列9所示的DNA分子；

所述sgRNAS1的靶序列为序列4所示的DNA分子；

所述sgRNAS2的靶序列为序列5所示的DNA分子。

5.根据权利要求3或4所述的方法，其特征在于：

所述CRISPR/Cas9系统包括含有sgRNAP1编码基因、sgRNAP2编码基因、sgRNAM1编码基因、sgRNAM2编码基因、sgRNAS1编码基因、sgRNAS2编码基因和cas9基因的重组载体；

所述sgRNAS1编码基因为序列10第5237-5312位所示的DNA分子；

所述sgRNAS2编码基因为序列10第5410-5485位所示的DNA分子；

所述sgRNAP1编码基因为序列10第5583-5658位所示的DNA分子；

所述sgRNAP2编码基因为序列10第5754-5829位所示的DNA分子；

所述sgRNAM1编码基因为序列10第5926-6001位所示的DNA分子；

所述sgRNAM2编码基因为序列10第6099-6174位所示的DNA分子；

或，所述Cas9蛋白的编码基因为序列10第7282-11553所示的DNA分子。

6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于：所述编辑为向所述受体番茄材料中导入所述重组载体。

7.根据权利要求1-6任一所述的方法，其特征在于：

每种所述方法中，在向所述受体番茄材料中导入所述重组载体后还包括如下步骤：选取PSY1、MYB12、SGR1三个基因至少一个突变的植株，为目的番茄多果色材料；

所述突变为杂合突变或纯合突变。