[发明专利]重组人源胶原蛋白及其应用

说明书

本发明提供一种重组人源胶原蛋白及其应用，编码该所述重组人源胶原蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示，所述重组人源胶原蛋白从氨基端依次包含：氨基端亲和纯化标签、人源I型胶原蛋白α2链成熟肽链以及羧基端亲和纯化标签。根据本发明实施例的所述重组人源胶原蛋白，通过在人源I型胶原蛋白α2链成熟肽链的两端都设计有特异性亲和纯化标签，该重组人源胶原蛋白易于分离纯化和检测，且该重组人源胶原蛋白具有更高的分子量和特殊的理化性质，易于发酵和表达，产量高，用途广。

技术领域

本发明涉及基因工程技术领域，更具体地，本发明涉及一种重组人源胶原蛋白及其应用。

背景技术

人体的衰老在表观上表现为皮肤状况的改变，如松弛、起皱等。皮肤的状况直接影响外表的美观和精神状态。皮肤中胶原蛋白的含量高达75％，它维持着皮肤的弹性和水润。胶原蛋白的流失是皮肤衰老的主要原因。提高皮肤中胶原蛋白的含量，有助于皮肤对抗衰老，恢复皮肤弹性。

I型胶原蛋白是目前已发现的29中胶原蛋白中组织分布最为广泛和含量最高的胶原蛋白，约占90％，约占动物机体总蛋白的27％左右。其在新组织的形态发生和细胞代谢中，赋予新组织机械强度和生化特性，对维护细胞、组织等的正常生理功能和损伤修复起着重要作用。

I型胶原蛋白具有良好的生物相容性、生物可降解性、无细胞毒性、抗氧化性等功能，并能促进细胞粘附和细胞增殖等功效，可广泛应用在医学、美容、化妆品、保健品等领域中。其在皮肤损伤修复、整形美容、增强机体免疫力等方面的作用也已获得共识。

目前国内重组胶原蛋白的相关研究已经很多，如西北大学和华南理工大学等均有相关的研究报道，但其主要研究的是胶原蛋白短肽片段，尚无有关重组人源I型胶原α2链全长肽的报道。

目前市场上已流通的重组I型胶原蛋白肽段，虽已表现出较优的功效，但因其片段较小，分子量低，也限制了其功能的发挥。I型胶原蛋白全长肽拥有更多的纤连蛋白FN结合位点，更容易发挥其胶原功能活性；其具有更高的分子量，拥有独特的生理生化特性，如其易形成一层透气的薄膜、抗降解时间长、交联后交联度更高，性能更优异；且其随时间推移发生的缓慢降解，可以更持久的补充胶原蛋白短肽，甚至与某些药物结合可以起到缓释作用。因此，为了充分开发其潜在价值，亟需解决其全长肽的生产与检测问题。

目前胶原蛋白的分理纯化，多采用分子筛和离子交换树脂进行分离，而胶原蛋白因其独特的G-X-Y结构使其很难分离开，尤其与同种胶原的降解片段，且该提纯工艺操作复杂及不同批次间提纯工艺难以稳定，导致市场上胶原蛋白短肽产品多为短肽及其降解物的混合物，很难获得具有单一肽链的胶原产品，限制了其广泛应用。

目前产品中胶原检测，主要是利用生物质谱技术研究胶原蛋白的类型和含量，该方法只能检测其是胶原，但不能确认其是否为全长片段，因此不适宜长片段肽链的全长性检测。

发明内容

本发明旨在至少解决上述技术问题之一。

为此，本发明提出一种重组人源胶原蛋白，该重组人源胶原蛋白纯化和鉴定方便，易于检测。

本发明还提出一种重组人源胶原蛋白的应用。

根据本发明第一方面实施例的重组人源胶原蛋白，编码该所述重组人源胶原蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示，所述重组人源胶原蛋白从氨基端依次包含：氨基端亲和纯化标签、人源I型胶原蛋白α2链成熟肽链以及羧基端亲和纯化标签。

根据本发明上述实施例的重组人源胶原蛋白，还可以具有如下的附加技术特征：

根据本发明的一个实施例，所述氨基端亲和纯化标签为Flag标签，所述羧基端亲和纯化标签为6His标签。

根据本发明的一个实施例，所述重组人源胶原蛋白全长为1056个氨基酸。