[发明专利]一种在反胶束酶体系中合成中长链甘油三酯的方法在审
申请号: | 201911095355.2 | 申请日: | 2019-11-11 |
公开(公告)号: | CN110885861A | 公开(公告)日: | 2020-03-17 |
发明(设计)人: | 邓泽元;张兵;陈孙妮;李静;李红艳 | 申请(专利权)人: | 南昌大学 |
主分类号: | C12P7/64 | 分类号: | C12P7/64 |
代理公司: | 南昌青远专利代理事务所(普通合伙) 36123 | 代理人: | 张以标 |
地址: | 330000 江西省南*** | 国省代码: | 江西;36 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 胶束 体系 合成 中长 甘油 方法 | ||
1.一种在反胶束酶体系中合成中长链甘油三酯的方法,其特征是:
(1)将脂肪酶缓冲水溶液和表面活性剂溶液混合,通过聚能超声,构成均一的反胶束酶体系;
(2)往体系中加入反应底物,辅以发散超声作用,反应得到中长链甘油三酯;
(3)利用分子蒸馏技术纯化产物。
2.如权利要求1所述的应用,其特征在于所述构成反胶束酶体系的表面活性剂溶液由2-乙基己基琥珀酸酯磺酸钠(AOT)和异辛烷组成,所述脂肪酶为非固定化水溶性Sn-1,3专一性脂肪酶,所述缓冲水溶液为50 mmol/mL磷酸二氢钠-磷酸氢二钠(PBS),所述反应底物分别为中链脂肪酸含量油与高长链脂肪酸含量油,目标终产物为中长链甘油三酯。
3.如权利要求1所述的应用,其特征在于所述反胶束酶体系构建方法是将AOT异辛烷溶液和非固定化水溶性Sn-1,3专一性脂肪酶缓冲水溶液(50 mmol/mL PBS,pH 6.5~8),其中[酶](mg/mL):[水](mmol/mL):[AOT](mmol/mL)=3~8:200~600:20~30,再采用聚能超声进行均一化,聚能超声频率为20~30 kHz,功率为200~400 W,超声温度为40~55 °C,超声总时间为35~56 s,超声方式为“超声5 s-停2 s”。
4.如权利要求1所述的应用,其特征在于所述酯化反应步骤为将0.3~0.5 g/(mL反应体系)中链脂肪酸含量油与高长链脂肪酸含量油以质量比1:1~1.3为混合加入反胶束酶体系中,在酶载量为总底物的0.5~3%、反应温度为40~55 °C的条件下反应2~4 h,过程中辅以发散超声作用,超声功率为30~40 kHz,功率为200~400 W,超声方式为“超声10 s-停20 s”,反应结束后加入2倍反应液体积的水,震荡分层,4200 rpm离心5 min,取上层油相,即为产物混合物。
5.如权利要求1所述的应用,其特征在于所述分子蒸馏纯化为二次蒸馏纯化,首先在进料速率为1~2 mL/min、加热温度为80~90 ℃、刮板转速为150~250 r/min、真空度为0.5 Pa的条件下进行一级分子蒸馏,除去游离脂肪酸等一级轻相,再对一级重相在进料速率为1~2mL/min、加热温度为170~180 ℃、刮板转速为150~250 r/min、真空度为0.5 Pa的条件下进行二级分子蒸馏,除去甘油一酯和甘油二酯,通过HPLC-MS检测二级重相中中长链甘油三酯的含量为74.39~92.40%。
6.根据权利要求1或2的应用,其特征在于可高效率高产率生产中长链甘油三酯。
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