[发明专利]基于LC-MS同时测定人血浆中8种抗结核药物的方法在审
申请号: | 201911095521.9 | 申请日: | 2019-11-11 |
公开(公告)号: | CN112782322A | 公开(公告)日: | 2021-05-11 |
发明(设计)人: | 张丽军;尹林;卢水华;贾小芳 | 申请(专利权)人: | 上海市公共卫生临床中心 |
主分类号: | G01N30/06 | 分类号: | G01N30/06;G01N30/02;G01N30/72 |
代理公司: | 上海元一成知识产权代理事务所(普通合伙) 31268 | 代理人: | 吴桂琴 |
地址: | 201508 上*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 基于 lc ms 同时 测定 血浆 结核 药物 方法 | ||
1.基于LC-MS同时测定人血浆中8种抗结核药物的方法,其特征在于,将提取液经稀释后采用液相色谱-质谱联用法测定抗结核药物的含量,其包括步骤:
(1)对血浆样品预处理
取血浆检材,加入内标,加入ACN:MEOH:45%TCA溶液将所述检材进行蛋白质沉淀,涡旋混合,12000rpm离心10min,转移上层有机相,用20%ACN+0.2%FA+1%HFBA按比例进行稀释;
(2)采用液相色谱-质谱联用法测定血浆中8种抗结核药物:利福布丁、氯苯吩嗪、左氧氟沙星、克拉霉素、硫酰亚胺、对氨基水杨酸、莫西沙星和阿米卡星的浓度;色谱柱为ACQUITY UPLC HSS T31.8μm column(2.1×100mm,Waters)超高效液相色谱柱。
2.按权利要求1所述的方法,其特征在于,同时检测血浆中8种抗结核药物:利福布丁、氯苯吩嗪、左氧氟沙星、克拉霉素、硫酰亚胺、对氨基水杨酸、莫西沙星和阿米卡星。
3.按权利要求1所述的方法,其特征在于,所述ACN:MEOH:45%TCA溶液为提取溶剂,其中ACN:MEOH:45%TCA=1:1:1。
4.按权利要求1所述的方法,其特征在于,所述的血浆样品预处理中不涉及提取液的挥干过程,将提取液经20%ACN+0.2%FA+1%HFBA按1:10比例稀释后进样液相色谱-质谱联用仪进行检测。
5.按权利要求1所述的方法,其特征在于,所述的血浆检材样品为50μL。
6.按权利要求1所述的方法,其特征在于,所述的血浆检材样品中加入各分析物对应的内标。
7.按权利要求1所述的方法,其特征在于,所述色谱的条件为:
色谱柱:采用的色谱柱为ACQUITY UPLC HSS T31.8μm column(2.1×100mm,Waters)超高效液相色谱柱;柱温:35℃;样品盘温度:4℃;流速:0.35mL/min;进样量:5μL,
质谱条件为:扫描方式:多反应离子监测(MRM)。
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