[发明专利]拟南芥转录因子AT3G46090基因在培育抗病性转基因植物中的应用

说明书

拟南芥转录因子AT3G46090基因在培育抗病性转基因植物中的应用，通过将拟南芥AT3G46090基因的CDS序列通过Gateway技术构建到带有FLAG蛋白标签的上游，并转化拟南芥植物，筛选并鉴定，最终获得转基因植物。对筛选到的植物进行分析发现其具有增强植物对丁香假单胞菌番茄亚种的抗性，该基因的表达影响植物的抗病表型，农作物中同源基因可能具有同样的功能，因此在生产中具有重要的意义。

技术领域

本发明属于遗传工程领域，具体地说，涉及拟南芥转录因子AT3G46090基因在培育抗病性转基因植物中的应用。

背景技术

我国作为人口大国，每年对粮食的需求量巨大。农业生产中农作物的产量会受各种因素的影响导致减产，其中病虫害是影响全球农业生产的重要因素之一。现在对农作物病虫害的防治主要采取化学药剂或生物防治的办法，但是这两种常见方法会引起二次污染，或其他一些生态危害。因此利用现代生物技术挖掘广谱抗性基因，为传统育种技术提供指导是十分必要的。现在已有一些广谱的抗病基因被挖掘到。对抗病相关基因进行进一步挖掘及拓展，为育种工作者提供更多的选择对未来的农作物生产具有重大意义。

发明内容

发明人针对筛选获得的一个拟南芥转录抑制因子AT3G46090进行了基因克隆、转基因植物构建及初步的抗病分析，发现该基因在植物抗病中发挥功能，该基因在不同物种中具有一定的保守性，后期或可进行农作物的抗病育种及改良。

作为本发明的一个方面，提供了拟南芥转录因子AT3G46090基因在培育抗病性转基因植物中的应用。

进一步的，所述应用具体包括，克隆转录因子AT3G46090基因的CDS序列，其序列如SEQ ID No.1所示，或该序列经替换、缺失或添加一个或几个碱基形成的具有同等功能的核苷酸序列；利用Gateway技术构建融合表达载体，该载体可在植物中表达融合蛋白AT3G46090-Linker-FLAG，其中linker为Gateway载体重组位点编码的氨基酸序列YPAFLYKVVDNS，FLAG标签的氨基酸序列为DYKDDDDK，AT3G46090为拟南芥转录因子AT3G46090编码的氨基酸序列；转化植物，筛选，鉴定，获得具有抗病性的转基因植物。

作为本发明的另一个方面，提供了前述载体及含有该载体的工程菌及含有该载体的转基因细胞系。

本发明的有益效果：本发明对拟南芥转录因子AT3G46090进行克隆和表达载体的构建，并转化到植物中进行研究，对筛选到的植物进行分析发现其可增强植物的抗病性，对农作物中同源基因可能具有同样的功能，因此在生产中具有重要的意义。

附图说明

图1为本发明实施例1中pGWB11的载体图谱；

图2为本发明实施例1中pGWB11-AT3G46090载体图谱；

图3为本发明实施例5中拟南芥接种丁香假单胞菌番茄亚种的表型分析，其中，左侧为拟南芥Col-0，右侧为AT3G46090转基因拟南芥株系。

具体实施方式：

本发明提供的项目实施方案用于说明本发明，但是不局限于本发明的研究范围。如果没有特别指出，本发明实施中的技术手段为本研究领域的常用技术，所用原料为市场所购。

实施例1拟南芥转录因子AT3G46090基因序列的获得以及植物表达载体的构建。

登录拟南芥信息资源数据库网站https://www.arabidopsis.org/servlets/TairObject？type＝sequenceid＝30046，找到转录因子AT3G46090基因的序列(SEQ IDNo.1)，根据AT3G46090基因的CDS设计PCR扩增引物，

AT3G46090-F:5'-ATGGTTGCGAGAAGTGAGGAA-3'