[发明专利]一种检测生物标志物的微生物传感器及检测方法、培养与检测芯片和检测系统

权利要求书

1.一种检测生物标志物的微生物传感器，其特征在于，由组分A和组分B组成，所述组分A为磁珠与核酸适配体的偶联物，所述核酸适配体能够与蛋白生物标志物肌酸激酶同工酶CK-MB特异性结合；所述组分B为转化荧光蛋白并表达抗性的基因工程菌液，在基因工程菌株上修饰核酸探针，所述核酸探针的核酸序列为5’-HS-CCCAACCCCCTAAAA-3’，所述核酸探针的核酸序列与所述核酸适配体互补，所述核酸适配体的核酸序列为5’-biotin-GGGGGGTGGGTGGGGGATCTCGGAGGATGCTTTTAGGGGGTTGGG-3’， 所述CK-MB与所述核酸探针竞争结合核酸适配体的结合位点，通过荧光强度来检测蛋白生物标志物CK-MB的含量。

2.根据权利要求1所述的检测生物标志物的微生物传感器，其特征在于，所述荧光蛋白为绿色、红色或黄色荧光蛋白中的一种，表达抗性为氯霉素抗性、氨苄霉素抗性或卡那霉素抗性。

3.根据权利要求1所述的检测生物标志物的微生物传感器，其特征在于，所述基因工程菌株为大肠杆菌、枯草芽孢杆菌或酵母菌。

4.根据权利要求1所述的检测生物标志物的微生物传感器，其特征在于，在基因工程菌株上修饰核酸探针以双功能蛋白交联试剂SMPB为交联剂。

5.一种包含权利要求1所述检测生物标志物的微生物传感器的培养与检测芯片，其特征在于，所述芯片从上至下设置为四层结构，第一层结构为覆盖层，第二层结构为通道层，所述通道层设有若干通道，第三层为培养层，在培养层设有若干培养区，不同的通道与培养区分别对应，用于不同培养液的分区培养，第四层为基底层，所述组分A与组分B孵育后再添加含有CK-MB的检测液，接种到含有抗性筛选试剂的培养液中形成接种液，通过通道将接种液通入培养层的培养区，在培养区进行接种液的培养。

6.根据权利要求5所述的培养与检测芯片，其特征在于，所述芯片各层均采用聚甲基丙烯酸甲酯PMMA材质，热键合而成。

7.一种包括权利要求5-6任一项所述培养与检测芯片的检测系统，其特征在于，所述系统包括微控制器、温度控制模块、双光路共焦检测器、培养与检测芯片和蠕动泵，微控制器与蠕动泵互联，由蠕动泵产生负压驱动注入芯片的接种液流动；微控制器与温度控制模块互联，温度控制模块调节培养与检测芯片培养区的温度；微控制器与双光路共焦检测器互联，双光路共焦检测器测定培养区的荧光强度。

8.根据权利要求7所述的培养与检测芯片的检测系统，其特征在于，所述光路双光路共焦检测器包括发出峰值为490 nm 3W和585 nm 2W的激光LED，四个滤光片，五个会聚透镜，三个长形双色透镜和两个光电传感器。