[发明专利]一种组织培养快速繁殖木薯种苗的方法有效
申请号: | 201911099434.0 | 申请日: | 2019-11-12 |
公开(公告)号: | CN110637725B | 公开(公告)日: | 2022-11-08 |
发明(设计)人: | 杜尚广;余波 | 申请(专利权)人: | 江西师范大学;南昌大学;南昌师范学院 |
主分类号: | A01H4/00 | 分类号: | A01H4/00 |
代理公司: | 南昌大牛知识产权代理事务所(普通合伙) 36135 | 代理人: | 陈秋平 |
地址: | 330000 *** | 国省代码: | 江西;36 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 组织培养 快速 繁殖 木薯 种苗 方法 | ||
一种组织培养快速繁殖木薯种苗的方法,包括以下步骤:(1)外植体选择;(2)外植体消毒;(3)丛生芽诱导培养;(4)生根培养;(5)幼苗驯化等步骤。此组织培养快繁技术包括丛生芽诱导、生根培养和驯化移栽,在保证高品质种苗的基础上,诱导过程同步增殖,生根过程同步壮苗,移栽成活率达75%以上。通过本发明的诱导培养、生根培养等操作,使得催芽方式简洁快速,脱毒方式简捷有效,诱导率高达98.1%,并且再生时间短:在诱导过程同步增殖,生根过程同步壮苗,驯化移栽后,约在65~70天内获得大量的木薯种苗。在保证较高丛生芽诱导率和繁殖系数的基础上,合理调节基本培养基和蔗糖等浓度,缩短了培养时间,可以降低生产成本。
技术领域
本发明属于植物组织培养技术,具体涉及一种组织培养快速繁殖木薯种苗的方法。
背景技术
木薯(Manihot esculenta Crantz)是大戟科木薯属灌木,原产于南美洲的热带地区。木薯是世界主粮之一,块根中含有丰富的淀粉,有着“淀粉之王”、“地下粮仓”等美称,与马铃薯、红薯并列称为世界三大薯类作物;同时它的单位面积提供的食物能量超过水稻、小麦、玉米和高粱,是人类主要的食用作物资源之一。木薯全年皆可种植,具有粗生易栽,耐干旱,耐贫瘠,病虫害少的优点,并且单产量较高,是一种理想的农作物。我国在19世纪20年代引种,现主要栽培于江西、广西、广东、海南、福建和四川等省份。
传统的种茎扦插繁殖方式存在繁殖率低、周期长和运输不便等问题;长期的无性繁殖导致品种严重退化,产量大幅降低,迫切需要对木薯栽培品种进行脱毒改良,建立快速繁殖体系。传统的种子繁殖方式易造成木薯后代单株之间差异较大,难以稳定保持优良性状。组织培养快繁技术是以优良无性系为外植体,通过无菌培养快速得到组培苗;该技术具有产量高,易于生产管理、且能保持原有品种的优良性状等优点,可以有效克服传统无性繁殖和种子繁殖存在的问题。
本发明采用木薯茎段为外植体,建立了快速高效的快繁体系,并有效克服传统繁殖周期长、品种严重退化以及产量大幅降低的问题,大大降低了木薯种苗培育的成本,可应用于大规模生产木薯种苗和科学研究。
发明内容
基于上述背景技术中提到的问题,本发明拟提供一种木薯的茎段组织培养快繁种苗的方法,解决现有技术存在的繁殖周期长、用种量大和品种严重退化的问题。
本发明包括以下步骤:
(1)外植体选择:选择健壮无病害、生长旺盛的植株,剪取距茎顶端约10厘米幼嫩茎段。从叶柄基部切除叶片,剪取带有腋芽的茎段,即为外植体。
(2)外植体消毒:将步骤(1)中的外植体用自来水冲洗10分钟,清除尘土和碎屑,再完全浸没于饱和洗衣粉溶液10分钟,流水冲洗30-60分钟,将洗好的茎段放入广口瓶,在无菌工作台上利用两步法脱毒,即75%酒精消毒20秒,无菌水冲洗2-3次,用0.1%升汞消毒6分钟,无菌水冲洗3-4次,置于无菌滤纸上吸干表面水分,最后将外植体剪成约1厘米茎段。
(3)丛生芽诱导培养:将步骤(2)中的外植体接种到丛生芽诱导培养基中。培养14天后获得木薯丛生芽,再切取再生芽茎段0.5-1厘米接种到丛生芽诱导培养基中,进行诱导分化、增殖培养,即诱导过程同步增殖;当扩繁系数达到10倍时,进行生根培养。温度(23-27)℃,光周期12h/d,光照强度6000lx。
(4)生根培养:将步骤(3)中获得的不定芽接种到生根培养基中,培养30天后,即可获得大量木薯试管苗,温度(23-27)℃,光周期12h/d,光照强度6000lx。
(5)幼苗驯化:取出试管苗,用自来水洗净根部残留的培养基,再用0.1%KMnO4浸泡30秒,最后用自来水清洗,将处理好的试管苗移栽至营养钵基质中驯化,将成活的幼苗移栽到大田中,即为木薯种苗。
作为优选,本发明步骤(1)过程中要优先保证木薯植株健壮块茎大、无病害,并带有幼嫩腋芽。
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