[发明专利]检测血液中奥氮平的方法

说明书

本发明的检测血液中奥氮平的方法包括：制备奥氮平标准储备液、制备奥氮平的标准中间液、制备内标工作液、制备标准溶液和利用液相色谱‑质谱联用仪检测标准溶液，拟合得到奥氮平对应的标准曲线方程为：y₁＝a*x₁+b；对待测血液进行处理，利用液相色谱‑质谱联用仪检测待测血液，计算出待测血液中的奥氮平浓度。在本发明中，对待测血液样品的处理方法以及内标物的选择，使得奥氮平的识别更为准确，分析时间短、干扰小，内标定量适宜特异性强、灵敏度高，同时，回收率，检测限和精密度等各项技术指标均符合要求，从而提高检测结果的准确度，消除系统误差。

技术领域

本发明涉及生物检测技术领域，特别涉及一种检测血液中奥氮平的方法。

背景技术

奥氮平是一种新的非典型神经安定药，属第二代抗精神病药，临床广泛用于精神分裂症和其它有严重阳性症状(例如：妄想、幻觉、思维障碍和猜疑)或阴性症状(例如：情感淡漠和言语贫乏)的精神病的急性期和维持治疗，故对奥氮平的监测具有重要的临床意义。

目前，检测服用奥氮平的患者的血液样本时，通常采用高效液相色谱法进行测试。

但是，通过上述方法检测血液样本中的奥氮平含量时，需要对血液样本进行前处理，例如，萃取。由于萃取处理的时间通常较长，从而使得检测时间长，导致血液样本的检测效率低。

发明内容

本申请的发明目的是提供了一种检测血液中奥氮平的方法，能够提高血液样本的检测效率。

本发明的一种检测血液中奥氮平的方法，其中：它包括以下步骤：

(一)标准溶液的标定

(a)制备奥氮平标准储备液

精确称取奥氮平标准品5.0mg置于2mL冻存管，用含水量为0％-30％的甲醇溶液进行溶解，并定容于1mL，得到奥氮平标准储备液，在-80℃条件下保存；

(b)制备奥氮平的标准中间液

用含水量为10％～80％甲醇稀释液稀释上述奥氮平标准储备液，制成含有浓度为7.5ng/mL-2400ng/mL的奥氮平的至少三种奥氮平的标准中间液，并在-80℃条件下保存；

(c)制备内标工作液

用含水量为10％～80％甲醇稀释液稀释奥氮平-d8储备液，得到一种含有10～1000ng/mL奥氮平-d8的内标工作液，并在-80℃条件下保存；

(d)制备标准溶液

分别移取5μL上述至少三种浓度的奥氮平标准中间液，在上述每一种奥氮平标准中间液中分别加入10μL的内标工作液和90μL含水量为10％～80％甲醇稀释液，并在转速为1000～2000rpm下涡旋混匀30s～1min，再加入300μL沉淀蛋白试剂乙腈，在转速为1000～2000rpm下涡旋混匀30s～1min，制成至少三种不同浓度的标准溶液，其中，每一种浓度的标准溶液中包含的内标物的浓度相同；

(e)拟合标准曲线方程

利用液相色谱-质谱联用仪检测上述每一种浓度的标准溶液，得到至少三种不同浓度的标准溶液的奥氮平和奥氮平-d8的图谱；从上述每种浓度的标准溶液的图谱中分别得到奥氮平的色谱峰峰面积和奥氮平-d8的色谱峰峰面积，分别以上述至少三种不同浓度的标准溶液中的奥氮平的色谱峰峰面积与奥氮平-d8的色谱峰峰面积的比值作为标准曲线方程的纵坐标y₁，以上述至少三种不同浓度的标准溶液中的奥氮平的浓度与奥氮平-d8的浓度的比值作为标准曲线的横坐标x₁，将上述检测所得的至少三种不同浓度的数据进行线性回归，拟合得到奥氮平对应的标准曲线方程为：y₁＝a*x₁+b，并且得到权重系数a和b；