[发明专利]以SF3B1为靶点在制备预防或治疗乳腺癌的药物中的应用

说明书

本发明属于生物医药技术领域，提供新的预防或治疗乳腺癌的分子靶点SF3B1，以及该靶点在制备预防或治疗乳腺癌的药物中的应用。其中以SF3B1基因为靶点包括采用基因敲除、基因敲减或者化学药物降低SF3B1基因的表达。SF3B1在乳腺癌细胞中的表达与正常组织细胞相比显著上调。SF3B1表达水平与淋巴结转移相关。乳腺癌中SF3B1基因敲除可诱导细胞凋亡和细胞周期阻滞。SF3B1基因敲除可降低细胞增殖、集落形成、侵袭和迁移能力。外显子跳越是SF3B1敲除后最常见的剪接事件。研究表明SF3B1可能是乳腺癌治疗的重要分子靶点。

技术领域

本发明属于生物医药技术领域，具体涉及以SF3B1为靶点在制备预防或治疗乳腺癌的药物中的应用。

背景技术

异常剪接是癌症相关表型的特征之一，并且肿瘤的发生通常伴随异常RNA剪接。众所周知，选择性剪接(AS)是真核生物的一个重要特征，由小核RNA(snRNA)和各种蛋白质组成的剪接体控制。剪接因子基因的突变和表达水平的改变可以导致外显子丢失、内含子保留、剪接位点的错误识别、开放阅读框的改变，从而影响大多数参与细胞周期控制、血管生成、凋亡、转移等基因的转录后加工和表达。癌症有许多在正常样本中不存在的选择性剪接事件。因此，靶向剪接去调控可能代表一种新的癌症治疗方法。

全基因组测序的应用揭示了多种癌症中剪接因子的显著体细胞突变。其中，SF3B1突变发生在乳腺癌，前列腺癌，子宫内膜癌，葡萄膜黑色素瘤和几种类型的血液系统恶性肿瘤。对892例和510例乳腺癌样本的全基因组水平的测序显示，特别是在雌激素受体(ER)阳性的乳腺癌患者中，SF3B1的突变显著且频繁。在这些突变中，错义突变占主导地位，大多数错义突变位于K700E和Q534P等突变热点上。这些突变可能在正向选择的压力下赋予癌细胞生长优势，并可能在乳腺癌的进化中发挥关键作用。

SF3B1基因位于染色体2q33.1，编码剪接因子3b的亚基1，它是U2小核核糖核蛋白复合体的核心部分。SF3B1对于识别和结合靠近3’剪接位点的分支点序列是必需的，并且在从前mRNA中精确切除内含子以形成成熟mRNA中发挥重要作用。SF3B1突变可能是肿瘤发生过程中的驱动事件，不仅导致转录偶联中的剪接异常，而且还影响基因组不稳定和干细胞的分化。

乳腺癌是对妇女健康的主要威胁之一。众所周知，乳腺癌是一种由大量分子异常驱动的异质性疾病，这些分子异常导致了其多样化的病理临床表现。尽管靶向治疗方法在乳腺癌治疗方面取得了成功，但耐药仍然是一个非常严重的问题，乳腺癌的分子机制仍需澄清。虽然SF3B1突变在乳腺癌中经常被报道，但SF3B1在乳腺癌中的表达状态、功能和分子后果尚未见报道。目前尚不清楚SF3B1是否可能成为乳腺癌的分子靶点。

发明内容

本发明的目的是提供新的预防或治疗乳腺癌的分子靶点SF3B1，以及该靶点在制备预防或治疗乳腺癌的药物中的应用。其中以SF3B1基因为靶点包括采用基因敲除、基因敲减或者化学药物降低SF3B1基因的表达。

需要说明的是，本申请经过研究发现，乳腺癌中SF3B1基因敲除可诱导乳腺癌细胞凋亡和细胞周期阻滞。SF3B1基因敲除可降低乳腺细胞增殖、集落形成、侵袭和迁移能力。SF3B1抑制剂可明显抑制乳腺癌细胞生长。具有预防肿瘤的效果；并且能够治疗并抑制已经存在的肿瘤细胞；因此，SF3B1基因缺失能够用于制备预防或治疗乳腺癌的药物。其中SF3B1基因缺失可以通过基因敲除、基因敲减或者化学药物降低SF3B1基因的表达实现。

本发明还提供了一种试剂盒，用于所述的以SF3B1基因为靶点采用基因敲除降低SF3B1基因的表达；所述试剂盒中包含：两个慢病毒shRNA序列：命名为SF3B1-sh1：5’-ccggGAGCACAGACCTCCAAAGATTctcgagAATCTTTGGAGGTCTGTGCTCtttttg-3’；命名为SF3B1-sh2：5’-ccggTGCAACTGAACTTGAAGATGActcgagTCATCTT CAAGTTCAGTTGCAtttttg-3’。