[发明专利]一种区分非洲猪瘟病毒野毒株与基因缺失株的LAMP检测引物及试剂盒

权利要求书

1.一种区分非洲猪瘟病毒野毒株与MGF360-505R基因缺失株的LAMP检测引物组在制备区分非洲猪瘟病毒野毒株与MGF360-505R基因缺失株的检测试剂中的应用，其特征在于，所述LAMP检测引物组包括以下A、B两组引物，每组引物包括：一对外引物、一对内引物和一对环引物，

A组：

外引物：

P72-F3：TACTGTAACGCAGCACAG(SEQ ID NO:1)；

P72-B3：CGATAAATTTCCATCAAAGTTCTG(SEQ ID NO:2)；

内引物：

P72-FIP：TAACGTATCCAGAGCAAGAGAATTTGAAAGTTAATAGCAGATGCCG(SEQ ID NO:3)；

P72-BIP：ATGACCACTGGGTTGGTATTCCAATGCGATTAAAACCCCCG(SEQ ID NO:4)；

环引物：

P72-LF：CACTACGGCTGATCTTGTGGTAT(SEQ ID NO:5)；

P72-LB：CCGTGGCTTCAAAGCAAAGGTAATC(SEQ ID NO:6)；

B组：

外引物：

MGF360-505RQS-F3：GGATTATACTGGGAAAACCAT(SEQ ID NO:7)；

MGF360-505RQS-B3：GCTGATATTTTTTAGCCAGAGTT(SEQ ID NO:8)；

内引物：

MGF360-505RQS-FIP：CAGGGCTTCATTTACGGGAATGATTTTCGAGCAGGAAACAACTGT(SEQ IDNO:9)；

MGF360-505RQS-BIP：GCAGCGAGACGTTTCAATAAAAGTTTTCTATCTCCTTGCTTCCACC(SEQ IDNO:10)；

环引物：

MGF360-505RQS-LF：CAACTGTGTGCTTATACAGCAAC(SEQ ID NO:11)；

MGF360-505RQS-LB：GGCTTCTACCCTTTGTAATCAAAAC(SEQ ID NO:12)。

2.一种区分非洲猪瘟病毒野毒株与MGF360-505R基因缺失株的LAMP检测试剂盒，其特征在于，所述试剂盒中包含权利要求1中所述的引物组。

3.根据权利要求2所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒中还包括Bst DNA聚合酶、LAMP反应液、甜菜碱、阳性对照和阴性对照。

4.根据权利要求3所述的试剂盒，其特征在，所述LAMP反应液含有10mM dNTP、10×ThermoPol反应缓冲液、150mM MgSO4水溶液。

5.根据权利要求3所述的试剂盒，其特征在于，所述阳性对照为含有非洲猪瘟病毒P72基因片段的质粒和/或含有非洲猪瘟病毒缺失第27942-35500位两侧区域片段的质粒。

6.根据权利要求5所述的试剂盒，其特征在于，所述含有非洲猪瘟病毒P72基因片段的序列如SEQ ID No.13所示，所述缺失第27942-35500位两侧区域片段的序列如SEQ IDNo.14所示。

7.根据权利要求2至6任一所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒中两组引物的外引物、环引物，内引物的摩尔比为1:5:10。